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Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

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OH<br />

O<br />

43<br />

CH 3<br />

HO OH<br />

Phénol Anthrone Orcinol<br />

Figure 29 : Exemples <strong>de</strong> chromogènes utilisés pour les dosages colorimétriques<br />

Le principe <strong>de</strong>s dosages colorimétriques repose sur la con<strong>de</strong>nsation, par estérification,<br />

d’un chromogène (Figure 29) avec les produits <strong>de</strong> déshydratation <strong>de</strong>s pentoses, hexoses <strong>et</strong><br />

aci<strong>de</strong>s uroniques. En milieu aci<strong>de</strong> fort <strong>et</strong> à chaud, ces oses se déshydratent respectivement en<br />

<strong>de</strong>s dérivés du furfural, 5-hydroxyméthylfurfural <strong>et</strong> <strong>de</strong> l’aci<strong>de</strong> 5-formylfuroïque (Figure 30).<br />

O<br />

HO<br />

O<br />

HO<br />

O<br />

O<br />

H<br />

O<br />

H<br />

O<br />

OH<br />

Furfural 5-hydroxyméthyl furfural Aci<strong>de</strong>-5-formylfuroïque<br />

Figure 30 : Dérivés furfuriques obtenus par déshydratation <strong>de</strong>s pentoses, <strong>de</strong>s hexoses <strong>et</strong> <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s uroniques<br />

Les chromophores ainsi formés absorbent dans le domaine du visible<br />

proportionnellement avec la quantité d’oses présents. Le développement <strong>de</strong> la coloration, la<br />

longueur d’on<strong>de</strong> à laquelle on observe l’absorption maximale, ainsi que l’intensité <strong>de</strong><br />

l’absorbance dépen<strong>de</strong>nt <strong>de</strong>s réactifs, <strong>de</strong> la nature <strong>et</strong> <strong>de</strong> la structure d’ose dosé (hexose,<br />

pentose, aci<strong>de</strong> uronique ou sucre réducteur) <strong>et</strong> <strong>de</strong>s conditions <strong>de</strong> réaction (température, temps<br />

<strong>de</strong> réaction <strong>et</strong> concentration <strong>de</strong> l’aci<strong>de</strong>).<br />

Dosage <strong>de</strong>s oses totaux<br />

Le dosage <strong>de</strong> la quantité <strong>de</strong> oses totaux, mesurée selon la métho<strong>de</strong> <strong>de</strong> Dubois <strong>et</strong> al., 120<br />

utilise le phénol plus sensible à la détermination quantitative <strong>de</strong>s oses que <strong>de</strong>s chromogènes<br />

tels que le naphtol ou l’anthrone.<br />

Dosage <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s uroniques<br />

Le méta-hydroxydiphényle en présence <strong>de</strong> tétraborate <strong>de</strong> sodium a été utilisé comme<br />

chromophore sélectif lors du dosage <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s uroniques. 121 Les concentrations relatives en<br />

oses neutres <strong>et</strong> en aci<strong>de</strong>s uroniques <strong>de</strong>s solutions polysaccharidiques ont été déterminées par<br />

la métho<strong>de</strong> <strong>de</strong> correction développée par Montreuil <strong>et</strong> Spick. 122 Il est alors possible <strong>de</strong>

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