Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

par l’enzyme, diffuse autour du site activé pour oxyder les substrats alors que l’enzyme, de
par sa taille, ne pourrait entrer directement dans cette maille lignocellulosique. C’est une
réaction radicalaire dont le principe est décrit en Figure 16. 67
Figure 16 : Proposition de mécanisme d’action de la laccase
Dans le cas d’oxydation des composés non-phénoliques ou pour le blanchiment de la
pâte à papier, la plupart des protocoles 68-70 utilisent la laccase en milieu tamponné (citrate,
tartrate ou acétate de sodium) et oxygéné (O2) à un pH compris entre 4 et 5,5, une température
inférieure ou égale à 50°C de façon à ne pas dénaturer l’enzyme et entre 30 minutes et 24 h.
Les médiateurs les plus souvent utilisés sont l’ABTS (acide 2,2-azino-bis(3-
éthylbenzothiazoline-6-sulfonique)), l’acide violurique et le HOBt (1-hydroxybenzotriazole)
(Figure 17) mais l’utilisation de médiateurs naturels 71 comme la vaniline et ses dérivés ou
encore des di et triméthylphénols (Figure 18) permettent également la délignification mais
dans de moindres proportions que les précédents médiateurs.
HO 3 S
O2 + 2H +
H2O
N
S
O
N N
OH
S
N
SO 3 H
31
H
O
N
O
N
H
N OH
Figure 17 : Principaux médiateurs utilisés (d’après la littérature)
OMe
Laccase
Laccase +•
OH
Medox
Med
ABTS Acide violurique HOBt
Figure 18 : Exemples de médiateurs naturels
O
OH
Substrat
Substratox
Vaniline 2,6-diméthylphénol 2,4,6-triméthylphénol
N
N
N
OH