Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...
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Gestion, évolution <strong>et</strong> coût du proj<strong>et</strong><br />
Préparation <strong>et</strong> cadrage du proj<strong>et</strong><br />
Tout proj<strong>et</strong> qui se crée nécessite en amont une préparation mais également une<br />
évaluation <strong>de</strong>s risques afin <strong>de</strong> limiter les échecs. Dans le cadre <strong>de</strong> ma thèse, la préparation a<br />
consisté en la recherche d’un financement qui s’est matérialisé sous la forme d’une bourse<br />
régionale. Des premières expériences réalisées lors du stage <strong>de</strong> master recherche ont permis<br />
<strong>de</strong> voir ce qui pourraient fonctionner <strong>et</strong> ainsi <strong>de</strong> donner un premier cadre à la thèse. Les<br />
nombreuses discussions avec mes encadrants le Docteur Vincent Gloaguen <strong>et</strong> le Professeur<br />
Pierre Krausz mais aussi avec les autres membres du laboratoire ont permis d’évaluer les<br />
risques mais également d’envisager une stratégie visant à limiter ces <strong>de</strong>rniers au maximum.<br />
Conduite du proj<strong>et</strong><br />
Ce proj<strong>et</strong> <strong>de</strong> thèse s’est déroulé entre octobre 2006 <strong>et</strong> juill<strong>et</strong> 2009 au sein du<br />
Laboratoire <strong>de</strong> Chimie <strong>de</strong>s Substances Naturelles (LCSN, EA 1069) <strong>de</strong> l’Université <strong>de</strong><br />
Limoges. Des points d’avancement réguliers avec mes encadrants ont eu lieu sans périodicité<br />
définie tandis que <strong>de</strong>s réunions <strong>de</strong> laboratoire furent programmées au cours <strong>de</strong>squels les<br />
différents doctorants <strong>et</strong> stagiaires exposent leurs travaux, perm<strong>et</strong>tant ainsi une discussion<br />
constructive avec tous les autres acteurs du LCSN. Dans la première phase <strong>de</strong> mon travail, j’ai<br />
extrait <strong>et</strong> caractérisé structuralement <strong>de</strong>s polysacchari<strong>de</strong>s <strong>de</strong> différentes essences selon <strong>de</strong>s<br />
méthodologies bien i<strong>de</strong>ntifiées au laboratoire, ce qui m’a permis d’acquérir dès le début <strong>de</strong> la<br />
thèse les bases <strong>de</strong> l’extraction <strong>de</strong> biomolécules. Par la suite, une collaboration avec le<br />
Professeur Kraemer <strong>et</strong> Mme Sainte-Catherine du laboratoire d’Oncologie Moléculaire <strong>et</strong><br />
Cellulaire <strong>de</strong> l’université <strong>de</strong> Paris XIII, a permis d’étudier l’activité cytotoxique <strong>de</strong> ces<br />
molécules sur <strong>de</strong>s systèmes <strong>biologique</strong>s. En parallèle <strong>de</strong> nouvelles méthodologies d’extraction<br />
<strong>de</strong>s polysacchari<strong>de</strong>s impliquant <strong>de</strong>s traitements physiques ont été expérimentées sans succès<br />
avec pour objectif <strong>de</strong> limiter le recours à <strong>de</strong>s solvants polluants. Nous nous sommes alors<br />
réorientés vers l’établissement <strong>de</strong> nouveaux protocoles <strong>de</strong> délignification, étape préalable à<br />
l’extraction <strong>de</strong> nos polysacchari<strong>de</strong>s d’intérêt. Dans un premier temps, je me suis appuyée sur<br />
ses connaissances en termes <strong>de</strong> biochimie pour développer un protocole enzymatique,<br />
protocole qui a nécessité la mise en place d’un plan d’expériences afin d’optimiser les<br />
paramètres <strong>de</strong> réaction. Les résultats n’étant pas à la hauteur <strong>de</strong> nos espérances, j’ai poursuivi<br />
ce travail par la synthèse <strong>de</strong> composés tels les phtalocyanines <strong>et</strong> les porphyrines mimant<br />
l’activité <strong>de</strong>s enzymes précé<strong>de</strong>mment utilisées mais moins sensibles à la température <strong>et</strong> au<br />
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