Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

à 80°C par évaporation du méthanol chlorhydrique sous un flux d’azote. La phase
méthanolique est délipidée par trois lavages successifs à l’heptane (3 x 1 mL). Elle est à
nouveau évaporée sous flux d’azote.
Triméthylsilylation
Les méthylglycosides sont triméthylsilylés pendant 2 h à température ambiante par
200 µL d’un mélange V/V pyridine/BSTFA (N,O-bis-triméthylsilyl-trifluoroacétamide) à 1 %
de triméthylchlorosilane (TMCS) avant de pouvoir être injectés en CPG.
III.2.6.b. Analyse des dérivés TMS en CPG
Les méthylglycosides triméthylsilylés sont ensuite identifiés et dosés par CPG sur un
chromatographe Perichrom PR-2100 en comparaison avec des échantillons témoins.
L'élévation de la température du four est programmée de 130 à 210°C à raison de 2°C.min -1 ,
avec un palier de 5 min à 190°C, puis de 210 à 260°C à raison de 5°C.min -1 . Les résultats sont
exprimés en pourcentage molaire après correction des aires des pics.
III.2.7. Evaluation du taux d’acétylation et d’acide 4-O-
méthylglucuronique
Le calcul de ces pourcentages a été effectué par utilisation de la RMN 1 H. Les spectres
de RMN ont été réalisés sur un appareil Bruker DPX-400 à une fréquence de 400,13 MHz au
Service commun de RMN de l’Université de Limoges. Les déplacements chimiques sont
exprimés en ppm ; le tetraméthylsilane étant pris comme référence interne (δ = 0 ppm). Les
spectres sont enregistrés dans l’eau deutériée. Les pourcentages ont été calculés selon la
méthode décrite au paragraphe I.3.1.c (Prepière Partie) pour les différents xylanes testés.
III.3. Autohydrolyse des xylanes
Cette méthode de fragmentation a été utilisée pour différents glucuronoxylanes de
châtaignier et d’argan.
III.3.1. Protocole
Le protocole utilisé a été adapté de Cescutti et al., 238 pour l'analyse d'un polysaccharide
acide. Une solution aqueuse de polysaccharide à 1 mg.mL -1 est convertie en sa forme acide
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