Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

0,02 M en utilisant une électrode de verre et un pHmètre. Un blanc est réalisé à partir du
polysaccharide non oxydé. Le nombre de moles de fonctions carboxyliques crées est calculé
selon la formule suivante :
n COOH(échantillon) = ( Véq (blanc) – Véq (échantillon))* [HCl]
III.2.5. Dosage des fonctions aldéhydes (réaction de Cannizarro)
Un prélèvement d’une masse de 50 mg d’échantillon est mis en solution dans 10 mL
de soude 0,1 M. Le mélange est chauffé à 70°C pendant 10 minutes sous agitation
magnétique. L’excès de soude est alors titré en retour par HCl 0,02 M en utilisant une
électrode de verre et un pHmètre. Un blanc est réalisé à partir du polysaccharide non oxydé.
Le nombre de moles de fonctions carboxyliques crées est calculé selon la formule suivante :
n CHO(échantillon) = 2*(( Véq (blanc) – Véq (échantillon))* [HCl] - n COOH(échantillon))
III.2.6. Etude de la composition monosaccharidique par CPG
Le principe de cette méthode repose sur l’obtention de méthylglycosides
triméthylsilylés par méthanolyse suivie d’une pertriméthylsilylation des monosaccharides
libérés.
III.2.6.a. Préparation des dérivés methylglycosides triméthylsilylés
Les monosaccharides neutres et les acides uroniques sont identifiés et analysés sous
forme de méthylglycosides O-triméthylsilylés selon la méthode de Kamerling et al., 128
modifiée par Montreuil et al., 136 . Deux cents à cinq cents microgrammes de polysaccharides,
auxquels on ajoute un témoin interne, le méso-inositol (MI), à raison de 50% de la quantité de
polysaccharide, sont traités. Cette analyse, qui a été adaptée à l’analyse de poudres d’origine
végétale par Marga et al., 237 , a été également utilisée pour l’étude de la composition
monosaccharidique des sciures brutes et des résidus d’extraction.
Méthanolyse
Les monosaccharides sont libérés sous forme de méthylglycosides par ajout de 1 mL
d’une solution de chlorure d’acétyle 1 M dans du méthanol anhydre (Instant methanolic HCl ;
Alltech Réf. 18053) sur 200 µg d’un échantillon polysaccharidique anhydre contenant 20 µg
d’un étalon interne, le méso-inositol (MI). La méthanolyse est stoppée après 24 h de réaction
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