Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...
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d’éthanol à 80% à 80°C pendant 7 h. Le résidu obtenu (RSox) est alors refroidi à température<br />
ambiante avant d’être mis à sécher une nuit à l’étuve à 40°C.<br />
III.1.3.c. <strong>Extraction</strong> <strong>de</strong>s pectines<br />
Le mo<strong>de</strong> opératoire est le même que celui décrit dans III.1.1.c.<br />
III.1.3.d. Délignification <strong>chimique</strong> par le chlorite <strong>de</strong> sodium<br />
Le mo<strong>de</strong> opératoire est le même que celui décrit dans III.1.1.d.<br />
III.1.4. <strong>Extraction</strong> alcaline <strong>de</strong>s xylanes<br />
Deux grammes d’holocellulose <strong>de</strong> péricarpe d’argan sont ajoutés à 100 mL d’une<br />
solution <strong>de</strong> KOH 4,3 M à 3 mg.mL -1 <strong>de</strong> NaBH4 (agent réducteur). L’enceinte d’extraction est<br />
saturée à l’argon pour prévenir tout risque <strong>de</strong> dégradation du produit, puis placée sous<br />
agitation magnétique à température ambiante pendant 24h. A la fin <strong>de</strong> la réaction, la<br />
suspension est filtrée <strong>et</strong> le résidu est rincé à l’eau distillée puis lyophilisé. Le pH du filtrat est<br />
porté à 5,5 par ajout d’aci<strong>de</strong> acétique glacial. Il est ensuite placé en dialyse 48h dans une<br />
membrane Spectrapor dont le seuil <strong>de</strong> coupure est compris entre 6000 <strong>et</strong> 8000 Da. A la fin <strong>de</strong><br />
la dialyse, la solution est centrifugée <strong>de</strong> façon à séparer la fraction insoluble (contenant<br />
l’homoxylane) <strong>de</strong> la fraction soluble (qui contient le 4-O-méthylglucuronoxylane). Après<br />
concentration <strong>de</strong> c<strong>et</strong>te <strong>de</strong>rnière fraction, les hémicelluloses <strong>de</strong> la fraction soluble sont<br />
précipitées par 3 volumes d’éthanol puis centrifugées pendant 20 minutes à 1860 g (2000<br />
rpm). Le surnageant éthanolique est éliminé <strong>et</strong> le culot est repris dans <strong>de</strong> l’eau distillée.<br />
III.2. Caractérisations <strong>chimique</strong> <strong>de</strong>s xylanes<br />
III.2.1. Etu<strong>de</strong> <strong>de</strong> la composition centésimale<br />
III.2.1.a. Dosage <strong>de</strong>s oses<br />
L’appréciation <strong>de</strong> la quantité en oses neutres <strong>et</strong> en aci<strong>de</strong>s uroniques présents dans les<br />
polysacchari<strong>de</strong>s repose sur 2 dosages complémentaires :<br />
- le dosage <strong>de</strong>s oses totaux par la métho<strong>de</strong> <strong>de</strong> Dubois <strong>et</strong> al., 120 ,<br />
- le dosage <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s uroniques par la métho<strong>de</strong> <strong>de</strong> Blumenkrantz <strong>et</strong> Asboe-Hansen 121 .<br />
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