Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

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III.1.1.f. Délignification par des phtalocyanines et des porphyrines sulfonées et métallées par le fer ou le manganèse Dans 25 mL d’eau distillée sont placés 250 mg de sciures dépectinées ou d’holocellulose auxquels on ajoute la phtalocyanine ou la porphyrine (dont la quantité varie entre 4,8 µmol et 10,6 µmol) ainsi que 1 mL d’H2O2 à 35% par tranche de 24 h de réaction. La réaction est placée sous agitation magnétique pendant des temps variables (de 1 à 100 h) et des températures variables (20 et 40°C). A la fin de la réaction, la solution est filtrée ; le résidu est ensuite rincé à l’eau distillé puis lyophilisé. III.1.1.g. Délignification photochimique en milieu oxygéné Dans 25 mL d’eau distillée sont placés 250 mg de sciures dépectinées ou d’holocellulose auxquels on ajoute 14 mg de photosensibilisateur (qui peuvent être la TPPS, le Rose de Bengale ou des phtalocyanines sulfonées de zinc, aluminium ou nickel). La réaction est placée sous agitation magnétique et sous irradiation lumineuse de deux ampoules de 100 watts pendant 8 jours à température ambiante. A la fin de la réaction, la solution est filtrée, le résidu est ensuite rincé à l’eau distillé puis lyophilisé. III.1.2. Extraction des xylanes III.1.2.a. Extraction alcaline Un gramme d’holocellulose est ajouté à 50 mL d’une solution de KOH 4,3 M à 3 mg.mL -1 de NaBH4 (agent réducteur). L’enceinte d’extraction est saturée à l’argon pour prévenir tout risque de dégradation du produit, puis placée sous agitation magnétique à température ambiante pendant 24 h. A la fin de la réaction, la solution est filtrée et le résidu est rincé à l’eau distillée puis lyophilisé. Le pH du filtrat est ajusté à 5,5 par ajout d’acide acétique glacial. Il est ensuite placé en dialyse 48h dans une membrane Spectrapor dont le seuil de coupure est compris entre 6000 et 8000 Da. Après concentration, les hémicelluloses sont précipitées par 3 volumes d’éthanol puis centrifugées pendant 20 minutes à 1860 g (2000 rpm). Le surnageant éthanolique est éliminé et le culot est repris dans de l’eau distillée. III.1.2.b. Extraction aqueuse des xylanes L’extraction se fait toujours dans de l’eau distillée et à raison de 1g de matière pour 50 mL de solvant. La réaction a lieu à reflux (100°C) sous agitation magnétique pendant une 160
heure. Après refroidissement de la solution, celle-ci est filtrée sur papier filtre et le résidu est lyophilisé. III.1.2.c. Extraction des xylanes aux micro-ondes Toutes les extractions on été réalisées dans un microndes de laboratoire (Milestone, modèle microSynth) à une puissance de 200 W et durant 10 minutes à la température sélectionnée. Choix du solvant Dans un bicol, on ajoute 50 mL de solvant (eau distillée, DMSO ou DMA selon les cas) à 1 g d’holocellulose. Le ballon est surmonté d’un réfrigérant et placé dans l’enceinte du four à micro-ondes. La consigne de température est de 100°C pour l’eau, 165°C pour le DMA et 189°C pour le DMSO. Après irradiation, la solution est filtrée sur papier filtre et le résidu rincé abondamment à l’eau distillée. Pour les extractions qui se sont faites dans les solvants organiques, 50 mL d’eau distillée sont ajoutés au filtrat avant que celui-ci ne soit placé deux jours en dialyse dans des membranes dont le seuil de coupure se situe entre 6000 et 8000 Da. Prétraitements ultrasons Les traitements ultrasons se font à l’aide d’une sonde à ultrasons Sonifier Cell Disruptor B-30 durant des temps variables et selon un fonctionnement discontinu à 25, 50, 75 ou 100% de la puissance maximale et à une fréquence de 20 kHz. B. Xylanes de péricarpe d’argan III.1.3. Extraction des xylanes à partir de péricarpe d’argan III.1.3.a. Matériel biologique Les péricarpes d’argan nous ont été fournis par la société EFAS de Ait Amira au Maroc. Ils ont été broyés puis tamisés de façon à obtenir une fine poudre blanche. III.1.3.b. Extraction à l’éthanol Cette première étape permet d’éliminer les sucres circulants et les tannins solubles. L’extraction a été réalisée à partir de 25 g de poudre de péricarpes d’argan dans 900 mL 161
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Enfin, je remercie mes proches. Mer
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Ionisation par MALDI Le MALDI (Matr
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lumière dispersée et la concentra
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Additifs alimentaires Applications
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Essai (a) Les données de la litté
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extraction aqueuse. On aboutit alor
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RESUME Extraction, caractérisation
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