Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...
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II.1.2.b. Chromatographie en phase gazeuse<br />
Un système Perichrom PR-2100 a été utilisé pour l'analyse <strong>de</strong>s méthylglycosi<strong>de</strong>s<br />
triméthylsilylés. Il est équipé d’une colonne capillaire CP-SIL-5CB (Chrompack ; L = 50 m,<br />
Øint = 0,32 mm ; phase : diméthylpolysiloxane) <strong>et</strong> d’un détecteur à ionisation <strong>de</strong> flamme<br />
(FID). Le gaz vecteur est l’azote sous pression <strong>de</strong> 75 kPa. La température <strong>de</strong> l’injecteur <strong>et</strong> du<br />
détecteur est fixée à 260°C. Le chromatographe est piloté par ordinateur <strong>et</strong> les<br />
chromatogrammes traités par le logiciel Winilab v.3 <strong>de</strong> Perichrom.<br />
II.1.2.c. Chromatographie basse pression sur Biogel P2<br />
Les séparations par chromatographie d’exclusion stérique sur colonne en basse<br />
pression, ont été réalisées sur colonnes <strong>de</strong> Biogel P2. Les colonnes sont équilibrées dans le<br />
système d’élution. L’élution se fait grâce à une pompe péristatique dont le débit est fixé à 10<br />
mL.h -1 <strong>et</strong> les différentes fractions sont recueillies à l’ai<strong>de</strong> d’un collecteur (Redifrac ;<br />
Pharmacia-Biotech.).<br />
II.1.2.d. Chromatographie liqui<strong>de</strong> haute pression (HPLC)<br />
Les profils HPLC <strong>de</strong>s masses moléculaires sont obtenus à l’ai<strong>de</strong> d’un système HPLC<br />
(Dionex P-680), équipé <strong>de</strong> <strong>de</strong>ux colonnes d’exclusion stérique PL-aquagel-OH mixed 8 µm<br />
(Polymers Laboratories-300*7,5mm). L’équilibrage se fait dans l’eau ultrapure (Millipore) à<br />
un débit <strong>de</strong> 1 mL.min -1 . Ce système est complété par un détecteur à indice <strong>de</strong> réfraction<br />
Sho<strong>de</strong>x (RI-101).<br />
Chapitre III.<br />
III.1. <strong>Extraction</strong> <strong>de</strong>s xylanes<br />
A. Xylanes <strong>de</strong> sciures <strong>de</strong> châtaignier<br />
III.1.1. Préparation <strong>de</strong> l’holocellulose<br />
III.1.1.a. Matériel <strong>biologique</strong><br />
Les sciures utilisées pour nos expérimentations sont <strong>de</strong>s sciures <strong>de</strong> châtaignier,<br />
arbre appartenant à la catégorie <strong>de</strong>s bois durs. Elles nous ont été fournies par l’établissement<br />
Mazières <strong>de</strong> la Chapelle Montbran<strong>de</strong>ix (87). Ces sciures ont été séchées à l’étuve ventilée<br />
durant trois jours à la température <strong>de</strong> 50°C. Elles ont par la suite été broyées puis tamisées (à<br />
200 <strong>et</strong> 500 µm) afin <strong>de</strong> faciliter l’extractabilité <strong>de</strong>s hémicelluloses qu’elles renferment.<br />
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