caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

Exposé bibliographique : La O-fucosyltransférase 2
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2.2.2.3 Localisation sub-cellulaire de l’enzyme Pofut2
La localisation exacte de l'enzyme Pofut2 reste sujette à discussion. La transfection de
cellules COS-7 avec une construction permettant l'expression d'une protéine POFUT2
humaine fusionnée avec un marqueur fluorescent (eGFP) révèle une localisation golgienne
(Menzel et al., 2004). Cependant, ces expériences ont été conduites avec l'ORF du variant B
humain qui code potentiellement une protéine inactive due à un épissage alternatif du transcrit
et à l'usage d'un codon stop prématuré. Dernièrement, une localisation réticulaire pour
l'enzyme Pofut2 a été démontrée (Luo, Nita-Lazar et al., 2006). Des expériences
d'ultracentrifugation sur des extraits protéiques de cellules COS-1 révèlent une activité O-
fucosyltransférase 2 dans le surnageant, contrairement à l'activité β4-galactosyltransférase 1
(témoin de localisation golgienne) qui se trouve dans le culot. Pofut2 serait donc une protéine
soluble. L’analyse de l’extrémité N-terminale des séquences peptidiques de Pofut2 chez
l'Homme, la souris, la drosophile et Caenorhabditis, montre l’existence d'un peptide signal
d’adressage au RE. Néanmoins, celles-ci ne possèdent pas de signal de rétention du RE de
type KDEL. Toutefois, il est possible que d’autres motifs non consensus soient impliqués
dans le mécanisme de rétention réticulaire.
Les O-fucosyltransférases 2 de Mammifères possèdent 3 sites potentiels de Nglycosylation.
Aucune étude n'a encore porté sur ceux-ci. Cependant, si l’enzyme Pofut2, tout
comme Pofut1, est effectivement localisée dans le RE, on peut penser que les N-glycanes sont
de type oligomannosidique voire hybride.
2.2.3 Rôles du O-fucose des domaines TSR
La thrombospondine I (TSP1) est une protéine O-fucosylée impliquée dans de
nombreux processus biologiques (agrégation des plaquettes sanguines, maintien de la
structure des filaments de fibrine, interactions cellulaires). Bien que le rôle des Ofucosylglycanes
qu’elle porte ne soit pas déterminé pour l'instant, il semblerait que les régions
peptidiques O-fucosylées soient impliquées dans l’interaction de la protéine avec de
nombreux partenaires (Adams et Tucker, 2000). Par exemple, son activité anti-angiogénique
serait due à l’interaction de la séquence YC 1 SVTC 2 G du TSR1 avec le CD36 présent à la
surface des cellules endothéliales (Asch et al., 1992). De même, la séquence C 1 SVTC 2 G
présente sur les TSR2 et 3 de TSP1 constituerait un site important pour les interactions
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