caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

Exposé bibliographique : La O-fucosyltransférase 2
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Figure 20 : Structure d'un O-fucosylglycane greffé sur un domaine TSR.
d'après Luo, Nita-Lazar et al., 2006.
2.2.2 Caractérisation de l’enzyme Pofut2
Pofut2 fut citée pour la première fois dans la littérature, en 2002 par Roos et ses
collaborateurs, lors d'une étude globale du génome de la drosophile qui concernait
l'identification de gènes codant des enzymes impliquées dans le métabolisme des glycanes
fucosylés. Cette étude leur a permis de reconnaître, sur la base d'homologies avec Pofut1, ce
second gène codant potentiellement une O-fucosyltransférase chez la drosophile et l'Homme,
nommé respectivement Ofut2 et POFUT2 (Roos et al., 2002). Une analyse phylogénétique
montre que ce gène est présent chez de nombreux autres Métazoaires et chez certains
protozoaires du genre Plasmodium (Martinez-Duncker et al., 2003).
2.2.2.1 Identification de l’activité O-fucosyltransférase 2
Ce n’est que cette année qu’un test d'activité a mis en évidence la présence d'une
enzyme, dans les cellules CHO, capable de O-fucosyler les TSR (Luo, Panin et al., 2006).
Pour sa réalisation, du GDP-L-fucose (substrat donneur), le troisième domaine TSR de la
thrombospondine I humaine (substrat accepteur) et du Mn 2+ (cation divalent) ont été utilisés.
Dans le même temps, les auteurs ont aussi démontré que l’enzyme Ofut2 de drosophile est
capable de réaliser ce greffage in vitro. Toutefois, un domaine TSR possédant une
conformation tridimensionnelle correcte impliquant la formation de trois ponts disulfures est
indispensable à la catalyse enzymatique. De façon plus étonnante, l’enzyme Ofut2, à la
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