caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

Exposé bibliographique : La O-fucosyltransférase 1
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2001). Les enzymes correspondantes possèdent respectivement 41,2 et 29,4% d'homologie
avec POFUT1 codé par le variant 1 humain.
2.1.2.4 Localisation sub-cellulaire de l’enzyme Pofut1
Lorsqu’en 1996, Wang et ses collaborateurs ont mis au point le test d'une activité Ofucosyltranférase
1, ils ont remarqué que celle-ci était présente dans les fractions solubles et
insolubles des extraits protéiques de cellules CHO. Ils en ont déduit que Pofut1, comme de
nombreuses glycosyltransférases, devait être une enzyme transmembranaire de type II
(Fig.14.), sensible à la protéolyse au niveau de son peptide de liaison (Kitazume et al., 2001).
Figure 14 : Représentation schématique d'une glycosyltransférase transmembranaire de type II
de l'appareil de Golgi.
Leur hypothèse sur la topologie de l’enzyme Pofut1 fut renforcée en 2001, lors du
séquençage de la partie N-terminale de la protéine purifiée, puisque celle-ci était dépourvue
des 29 premiers acides aminés (Wang et Spellman, 1998). Ainsi, Pofut1 qui possède des
glycanes oligomannosidiques ou hybrides serait une glycoprotéine de type II résidente du
réticulum endoplasmique ou du Cis-Golgi.
Des études plus récentes (Luo et Haltiwanger, 2005) montrent que l'activité de
l'enzyme Pofut1 se retrouve majoritairement dans la fraction soluble d'un extrait protéique de
cellules COS-1 (après lyse avec le détergent NP40 et sonication), contrairement à l'enzyme
β4Gal-T1, une galactosyltransférase transmembranaire golgienne prise comme témoin. Le
même type d'expérience réalisée après fractionnement de cellules hépatiques de rat confirme
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