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caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

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Résultats-Discussion : Etude <strong>du</strong> <strong>rôle</strong> de Pofut1 dans la différenciation de cellules C2C12<br />

__________________________________________________________________________________________<br />

Figure 66 : Vecteur témoin pmaxGFP fourni avec le kit de transfection Amaxa.<br />

Ce vecteur est relativement p<strong>et</strong>it : 3486 pb. L’expression de l’eGFP est sous le cont<strong>rôle</strong> <strong>du</strong> promoteur fort CMV.<br />

Figure 67 : Cytogramme biparamétrique (rapport taille vs fluorescence) obtenus lors d’une<br />

expérience de tri cellulaire après transfection <strong>des</strong> cellules C2C12 avec le plasmide pmaxGFP.<br />

58,24% <strong>des</strong> cellules expriment l’eGFP. R1 : pourcentage de cellules vivantes, R2 : pourcentage de cellules prises<br />

en compte, R3 : pourcentage de cellules exprimant l’eGFP.<br />

Dans le vecteur pmax, l’eGFP est sous le cont<strong>rôle</strong> <strong>du</strong> promoteur fort <strong>du</strong> gène précoce<br />

<strong>du</strong> cytomégalovirus humain (pCMV) perm<strong>et</strong>tant l’expression de protéines recombinantes dans<br />

toutes les cellules animales, <strong>et</strong> non <strong>du</strong> promoteur hFerH/m-EF1 comme dans le pVITRO2lGFP.<br />

Ce dernier est pourtant un promoteur fort qui perm<strong>et</strong> également l’expression de gènes<br />

dans toutes les cellules animales (communication InvivoGen, Toulouse, France). Il est<br />

cependant possible qu’il ne soit pas un promoteur optimal pour les cellules C2C12.<br />

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