caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

Résultats-Discussion : Résultats complémentaires de la publication 2
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l’adulte, alors que les variants transcriptionnels du gène Pofut2a y sont présents. Ces résultats
ont été confirmés par des expériences indépendantes qui révèlent toujours le profil présenté
dans la figure 54. Ces formes de haut poids moléculaires pourraient correspondre à des
dimères (100 KDa) et des trimères (150 KDa) d’enzymes Pofut2 ou être dues à une
association de Pofut2 avec d’autres protéines présentes dans les tissus adultes, association qui
serait résistante aux conditions dénaturantes de l’électrophorèse. Ces résultats mettent en
évidence un mode de fonctionnement différent de la O-fucosyltransférase 2 dans les tissus
embryonnaires et adultes. Des expériences d’immunoprécipitation seront toutefois nécessaires
pour confirmer la nature des formes protéiques de haut poids moléculaires présentes dans les
tissus musculaires squelettiques adultes.
Dans le but de révéler si des formes atypiques de la protéinePofut2 existaient dans les
muscles squelettiques d’organismes appartenant à une autre espèce nous avons utilisé
l’anticorps pour une réaction croisée sur des protéines extraites de deux tissus murins, du
poumon et du Semitendinosus (Fig.55.).
Figure 55 : Expression de Pofut2 dans deux tissus murins.
L’analyse a porté sur 50µg d’extrait protéique total d’un tissu et sur 100ng de protéine purifiée.
Une protéine qui correspondrait à Pofut2 est reconnue par l’anticorps, dans l’extrait de
poumon murin, à une taille de 50 KDa. Comme dans le cas du bovin, ce tissu présente une
autre forme protéique à un poids moléculaire supérieur (~150 KDa). Les muscles
squelettiques de souris n’exprimeraient pas non plus la forme active de l’enzyme puisqu’une
protéine de 100 KDa est majoritairement détectée. Ce résultat semble confirmer l’existence
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