caractérisation des enzymes bovines et étude préliminaire du rôle ...

Résultats-Discussion : Résultats complémentaires de la publication 1
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1.2 Résultats complémentaires
1.2.1 Expression tissulaire des variants transcriptionnels
Une recherche dans les banques de données moléculaires disponibles par Internet a
permis de mettre en évidence des EST bovins correspondant aux gènes Pofut1 et Pofut2.
Grâce à la sélection d’amorces spécifiques de part et d’autre des CDS de ces EST, cinq
variants transcriptionnels pour chacun des deux gènes ont pu être caractérisés et leurs
expressions au sein de treize tissus bovins adultes, analysées (cf. Publication 1, figure 5A et
B).
Nous avons en effet choisi d’utiliser un panel assez large de tissus. Les mêmes tissus
ont été prélevés sur trois bovins Charolais adultes agés de 19 mois du centre INRA de
Clermont-Ferrand-Theix, disséqués et congelés sur place par nos soins. Nous avons
sélectionné cinq muscles squelettiques ayant des métabolismes énergétiques différents :
lent/oxidatif, c’est-à-dire équipés de fibres adaptées à un effort d’intensité sous-maximale et
de longue durée (Rectus abdominis, Diaphragme et Onglet) et rapide/glycolytique, c’est-àdire
équipés pour un effort intense et bref (Semitendinosus et Longissimus thoraci).
Les analyses ont été effectuées de façon indépendante sur ces trois animaux. Les
résultats étant reproductibles, nous ne présentons que ceux obtenus sur un individu.
Quelque soit le tissu analysé et contrairement à leurs homologues humains et murins
(Wang et al., 2001, Shi et Stanley, 2003), les gènes Pofut1 et Pofut2 semblent faiblement
exprimés chez le bovin. Ainsi, des PCR classiques sur des ADNc obtenus après transcription
inverse d’ARNm extraits des différents tissus bovins n’ont jamais permis d’obtenir
d’amplification. Il a donc fallu systématiquement effectuer des PCR nichées avec deux
couples d’amorces.
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