Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...
Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...
Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013<br />
Chapitre 3 : Interactions <strong><strong>de</strong>s</strong> <strong>nanoparticules</strong> avec les cellules<br />
pas significativem<strong>en</strong>t différ<strong>en</strong>tes <strong>de</strong> l’absorbance d’une solution <strong>de</strong> résazurine seule dans les<br />
mêmes conditions. Les particules n’interfèr<strong>en</strong>t donc aucunem<strong>en</strong>t avec ce test.<br />
Après 4 heures d’exposition, on observe une activité métabolique comparable pour le témoin<br />
(cellules seules <strong>en</strong> culture) et les cellules exposées aux <strong>nanoparticules</strong> Si+10 et Si-10 à 0,6<br />
mg/mL et 0,06 mg/mL. Par contre, l’activité métabolique <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules exposées aux particules<br />
Si+40 et Si+200 est significativem<strong>en</strong>t accrue par rapport au témoin. A 24 heures d’exposition,<br />
les activités métaboliques sont comparables pour l’<strong>en</strong>semble <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules <strong>en</strong> contact avec <strong><strong>de</strong>s</strong><br />
particules positives (Si+10, Si+60 et Si+200). Par contre elle est légèrem<strong>en</strong>t inférieure dans le<br />
cas <strong><strong>de</strong>s</strong> particules négatives Si-10, et ce aux <strong>de</strong>ux conc<strong>en</strong>trations testées.<br />
Si on combine les résultats <strong>de</strong> ces <strong>de</strong>ux séries d’expéri<strong>en</strong>ces, il <strong>en</strong> résulte que les particules Si-<br />
10 induis<strong>en</strong>t une activité métabolique démultipliée dans le peu <strong>de</strong> cellules survivantes, à 4<br />
heures comme à 24 heures d’exposition à une susp<strong>en</strong>sion à 0,6 mg/mL. Ce résultat peut<br />
s’interpréter comme la réponse <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules à une situation <strong>de</strong> stress int<strong>en</strong>se résultant <strong>de</strong> la<br />
mort <strong>de</strong> nombreuses cellules voisines. Cet état <strong>de</strong> stress peut aussi partiellem<strong>en</strong>t expliquer<br />
l’activité importante <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules exposées à Si+200 et Si+60 p<strong>en</strong>dant 4 heures, à la différ<strong>en</strong>ce<br />
que dans ce cas il n’y a pas induction <strong>de</strong> mort cellulaire. Après 24 heures, les cellules<br />
sembl<strong>en</strong>t s’être adaptées à la situation et on retrouve une situation comparable au témoin.<br />
3.1.2.2 Génotoxicité induite par les <strong>nanoparticules</strong><br />
Pour compléter cette étu<strong>de</strong> <strong>de</strong> toxicité, nous avons étudié la génotoxicité pot<strong>en</strong>tielle <strong>de</strong> ces<br />
<strong>nanoparticules</strong> après 24 heures d’exposition, à l’ai<strong>de</strong> du test <strong><strong>de</strong>s</strong> comètes. Il existe différ<strong>en</strong>tes<br />
façons <strong>de</strong> prés<strong>en</strong>ter les résultats <strong>de</strong> ce test, nous avons choisi <strong>de</strong> représ<strong>en</strong>ter les fractions <strong>de</strong><br />
noyau <strong>de</strong> chaque catégorie <strong>de</strong> dommages : <strong>de</strong> 0 (pas <strong>de</strong> comètes, pas <strong>de</strong> génotoxicité) à IV<br />
(ADN presque <strong>en</strong>tièrem<strong>en</strong>t dans la queue <strong>de</strong> la comète, génotoxicité importante). Les comètes<br />
correspondant à ces différ<strong>en</strong>tes catégories sont représ<strong>en</strong>tées figure 3.7. En parallèle, l’indice<br />
d’<strong>en</strong>dommagem<strong>en</strong>t <strong>de</strong> l’ADN correspond à une représ<strong>en</strong>tation <strong>de</strong> l’<strong>en</strong>semble <strong><strong>de</strong>s</strong> catégories<br />
<strong>de</strong> dommages, le nombre <strong>de</strong> comètes <strong>de</strong> chaque catégorie étant pondéré par le numéro <strong>de</strong> la<br />
catégorie. Pour savoir si les résultats correspon<strong>de</strong>nt à une réelle génotoxicité, nous avons fait<br />
<strong>de</strong>ux témoins : l’un négatif où l’on analyse <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules <strong>en</strong> culture dans <strong><strong>de</strong>s</strong> conditions<br />
normales, l’autre positif où les cellules sont exposées à un ag<strong>en</strong>t génotoxique (staurosporine)<br />
p<strong>en</strong>dant 1 heure. Les résultats <strong>de</strong> ce test montr<strong>en</strong>t que seules les particules Si-10 prés<strong>en</strong>t<strong>en</strong>t<br />
une certaine génotoxicité comparée à celle <strong><strong>de</strong>s</strong> témoins, et ce uniquem<strong>en</strong>t à 0,6 mg/mL. En<br />
effet, qu’on regar<strong>de</strong> la répartition <strong><strong>de</strong>s</strong> comètes dans les différ<strong>en</strong>tes catégories ou l’indice<br />
92