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Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

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tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013<br />

Chapitre 3 : Interactions <strong><strong>de</strong>s</strong> <strong>nanoparticules</strong> avec les cellules<br />

h). Cep<strong>en</strong>dant le comportem<strong>en</strong>t <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules semble différ<strong>en</strong>t selon qu’elles sont exposées à<br />

<strong><strong>de</strong>s</strong> particules <strong>de</strong> 10 nm positives ou négatives. En effet, les particules négatives Si-10<br />

sembl<strong>en</strong>t internalisées sous forme d’agrégats larges et relativem<strong>en</strong>t <strong>de</strong>nses, tandis que les<br />

particules positives Si+10 sembl<strong>en</strong>t se disperser dans le cytoplasme.<br />

Pour déterminer le type <strong>de</strong> mécanisme d’<strong>en</strong>docytose, les cellules ont été incubées avec <strong><strong>de</strong>s</strong><br />

inhibiteurs spécifiques <strong><strong>de</strong>s</strong> voies d’internalisation clathrine et caveolae.<br />

Figure 3-5: Images <strong>en</strong> microscopie à fluoresc<strong>en</strong>ce <strong><strong>de</strong>s</strong> fibroblastes <strong>de</strong>rmiques humains après 24h<br />

d’exposition aux <strong>nanoparticules</strong> (0,6 mg/mL dans le <strong>milieu</strong> <strong>de</strong> culture) : a-d) sans inhibiteur, e-l)<br />

avec un inhibiteur : e-h) monodansylcadaverine, i-l) phorbol myristate acetate<br />

Après 24 heures d’exposition aux <strong>nanoparticules</strong> <strong>en</strong> prés<strong>en</strong>ce d’un inhibiteur <strong>de</strong> la voie<br />

clathrine, on ne détecte pas <strong>de</strong> particules internalisées par fluoresc<strong>en</strong>ce, et ce pour les quatre<br />

types <strong>de</strong> particules étudiées (fig. 3.5). De plus, on remarque que les cellules exposées aux<br />

particules Si+10 et Si-10 ne sembl<strong>en</strong>t pas avoir subi <strong>de</strong> dommages comme lors <strong>de</strong> l’exposition<br />

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