Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Table des figures
3.12 : Images en microscopie à fluorescence et MET des cellules NHDF après 7 jours
d’exposition aux nanoparticules et 7 jours de culture dans du milieu sans particules (a, b, c)
Si+200, (d, e, f) Si+40 ………………………………………………………………….. 102
3.13 : Distribution de taille des nanoparticules Si+200 évaluée par MET (a) dans l’eau, (b)
dans les cellules après 2 semaines, (c) hors des cellules après 2 semaines, (d) après 2
semaines dans le milieu de culture à 37°C ……………………………………………... 103
3.14 : Suivi du contenu du milieu renouvelé après une semaine d’exposition des cellules aux
nanoparticules, mesuré par fluorescence des espèces solubles (symboles creux) et des
nanoparticules libérées (symboles pleins) ……………………………………………… 105
4.1 : Images de MEB des gels à 3 mg/mL (H3) et 5 mg/mL (H5) ………………………... 112
4.2 : Dispositif de diffusion ……………………………………………………………….. 113
4.3 : Schéma des deux processus couplés pris en compte dans la modélisation……………115
4.4 : Courbes calculée de a) diffusion et b) dissolution …………………………………... 116
4.5 : Evolution de l’intensité totale de fluorescence en sortie d’un gel à 3 mg/mL lors de la
diffusion des particules de silice et décomposition du signal de diffusion de Si-10 en
formes solubles et nanoparticules ……………………………………………………… 118
4.6 : Coefficients de diffusion des particules calculés dans l’eau ………………………… 120
4.7 : Influence de la concentration en collagène et de la voie de fibrillogénèse sur la diffusion
totale (particules et formes solubles) des particules Si+60 et contribution des
nanoparticules et des formes solubles au signal de diffusion de Si+60 dans un hydrogel de
collagène à 5 mg/mL …………………………………………………………………… 124
4.8 : Modélisation de l’évolution du coefficient de diffusion en fonction de la concentration
en collagène …………………………………………………………………………….. 125
4.9: Influence des cellules sur la diffusion totale de Si+40 et Si-10 dans des gels de collagène
à 3 mg/mL ……………………………………………………………………………… 128
4.10 : Comparaison de l’influence de cellules vivantes et mortes sur la diffusion (a) et la
dissolution (b) de nanoparticules Si+60 dans un gel à 3 mg/mL ………………………. 130
4.11 : Internalisation, suivie par microscopie à fluorescence confocale, après 24 heures
d’exposition, des particules Si+60 dans les cellules immobilisées dans les gels de collagène
a) 1,5 mg/mL, b) 3 mg/mL, c) 5 mg/mL ……………………………………………….. 132
4.12 : Analyse de la colocalisation des signaux de fluorescence de la FITC et du lysosensor
dans une cellule de l’échantillon H1,5c exposé 24h aux Si+60, la zone 3 représente la
colocalisation du signal de la fluorescéine et du Lysosensor …………………………... 133
235