Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Chapitre 6 : Protocoles expérimentaux
Figure 6-6: Description du dispositif de diffusion et du suivi par spectroscopie de fluorescence
6.3.2.2 Dissolution
Les mesures de l’intensité de fluorescence du milieu de diffusion après centrifugation
montrent une intensité non nulle, ce qui traduit la présence de fluorescéine libérée par
dissolution des nanoparticules. Pour évaluer l’influence du collagène et des cellules dans ce
processus, la dissolution des nanoparticules dans du milieu de culture a été étudiée.
L’influence du collagène est obtenue par comparaison de la dissolution dans un gel de
collagène acellulaire et dans le milieu, celle des cellules est obtenue par comparaison entre les
gels acellulaires et cellularisés. Pour l’étude de la dissolution des nanoparticules dans le
milieu de culture seule, une suspension de nanoparticules à 0,6 mg/mL dans le milieu complet
est placée à 37°C, sous agitation. Au cours du temps, des prélèvements sont effectués et
analysés en spectroscopie à fluorescence (directement et après centrifugation dans un filtre
Nanosep 3 kD).
6.3.2.3 Modélisation
Les courbes de diffusion obtenues ayant une allure caractéristique, nous avons modélisé la
diffusion afin de remonter aux coefficients de diffusion et aux constantes d’adsorption-
désorption des nanoparticules dans le collagène. La difficulté de cette modélisation réside
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