Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Chapitre 6 : Protocoles expérimentaux
greffé des groupements amines en surface de ces particules (Badley 1990). Pour cela, avant
dialyse une partie de la suspension de particules est prélevée et diluée dans de l’éthanol
absolu. Puis l’APTES et l’ammoniaque sont ajoutés (10 mL de suspension dans 10 mL
d’éthanol avec 170 µL d’APTES et 800 µL de NH4OH). Cette suspension est laissée sous
agitation 16 h, à température ambiante. Ensuite, les particules dialysées sont conservées en
suspension dans de l’acide acétique à 17 mM.
6.1.1.5 Synthèse de nanoparticules incorporant des ponts disulfures
Les particules n%SS ont été synthétisées par voie sol-gel de type Stöber. Le précurseur de
silice (TEOS) est ajouté à une solution d’éthanol – ammoniaque, suivi immédiatement de
l’ajout du silane contenant le pont disulfure (figure 6.2). Selon le taux de disulfure voulu, la
concentration en composé disulfure est ajustée (tableau 6.2). Les concentrations des autres
réactifs sont maintenues constantes. Cette solution est laissée sous agitation magnétique à
température ambiante pendant 48 heures.
Les particules fluorescentes sont obtenues en ajoutant la solution FITC-APTES après l’ajout
du TEOS et du silane contenant le pont disulfure. Ces particules sont conservées en
suspension dans de l’acide acétique 17 mM.
Figure 6-2: Equation bilan de la synthèse des nanoparticules n%SS fluorescentes
Nanoparticules TEOS NH4OH 30% Disulfure Ethanol * FITC-APTES
0% 6,0 mL 7,5 mL - 150 mL 6,0 mL
10% 6,0 mL 7,5 mL 0,54 mL 150 mL 6,0 mL
20% 6,0 mL 7,5 mL 1,08 mL 150 mL 6,0 mL
30% 6,0 mL 7,5 mL 1,62 mL 150 mL 6,0 mL
40% 6,0 mL 7,5 mL 2,16 mL 150 mL 6,0 mL
Tableau 6-2: Composition des synthèses des nanoparticules hybrides % massique Disulfure/TEOS.
*uniquement pour les nanoparticules fluorescentes
182