Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Chapitre 5 : Nanoparticules de silice pour la libération intracellulaire de principes actifs
particule n’est plus visible. Ces structures résultent probablement de la silicification des
lysosomes suite à la dissolution des particules. Ceci n’a pas encore été prouvé, l’analyse par
EDX de la présence de silicium des structures en MET étant perturbée par le signal de
l’osmium. L’analyse des mêmes échantillons préparés pour le MET en absence d’osmium est
prévue.
Par ailleurs, il est intéressant de noter qu’en fonction du taux de disulfure présent dans les
particules, ces structures sont observées plus ou moins tôt et en quantité plus ou moins
importante. En effet, pour les particules 10%SS, on observe la formation de ces structures sur
les clichés à 7 jours d’exposition. Pour les particules 20%SS, cette formation a lieu entre 7 et
14 jours puisqu’à 7 jours on n’observe que des particules dans des vésicules tandis qu’à 14
jours on observe ces structures bien définies et sans particules au centre. Dans le cas des
particules 30%SS, des structures en formation sont visibles à 14 jours. Enfin, lorsque le taux
de disulfure est de 40%, on n’observe pas de telles structures, ni formées ni en formation,
même à 14 jours de culture. Il semble donc que la présence de disulfure au sein des particules
modifie leur dissolution intracellulaire, notamment la cinétique du phénomène. Etrangement,
plus le taux de disulfure augmente moins les particules semblent subir de dissolution
intracellulaire, en tout cas plus le phénomène semble retardé. Ce résultat est en accord avec
les courbes d’exocytose/dissolution présentées figure 5.12.
Enfin, la figure 5.13 f montre, à 14 jours de culture, des particules SS30% qui se sont
détachées de la cellule avec un fragment de membrane, ce qui résulte peut-être de l’exocytose
de particules non dissoutes de façon intracellulaire.
5.3.4 BILAN SUR L’INTERACTION DES PARTICULES AVEC LES CELLULES
Cette étude a permis de montrer que l’introduction de ponts disulfures modifie le
comportement des particules en présence de cellules. En effet, même si toutes les particules
n%SS étudiées sont internalisées dans les cellules, la cinétique du processus semble d’autant
plus lente que le taux de disulfure augmente. Par ailleurs, l’incorporation de ponts disulfures
modifie apparemment la quantité de particules internalisées. Cet effet est, a priori, dû aux
ponts disulfures eux-mêmes puisque la taille et la charge de surface des particules n%SS
varient peu.
D’autre part, la présence des ponts disulfures modifie le comportement intracellulaire des
particules. En effet, plus le taux de disulfures augmente plus la quantité de nanoparticules et
de formes solubles libérées par exocytose diminue. Par ailleurs, les particules semblent subir
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