Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...
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tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013<br />
Chapitre 5 : Nanoparticules <strong>de</strong> <strong>silice</strong> pour la libération intracellulaire <strong>de</strong> principes actifs<br />
5.3.3 EXOCYTOSE ET DISSOLUTION INTRACELLULAIRE<br />
L’étu<strong>de</strong> précé<strong>de</strong>nte a montré que les particules peuv<strong>en</strong>t r<strong>en</strong>trer dans les cellules. Leur<br />
prés<strong>en</strong>ce dans <strong><strong>de</strong>s</strong> vésicules intracellulaires suggère que l’internalisation se fait par un<br />
mécanisme d’<strong>en</strong>docytose. Ce phénomène a été mis <strong>en</strong> évi<strong>de</strong>nce pour les particules sans pont<br />
disulfure dans le chapitre 3 <strong>en</strong> utilisant <strong><strong>de</strong>s</strong> inhibiteurs <strong><strong>de</strong>s</strong> voies principales d’internalisation<br />
(clathrine et caveolae). La même étu<strong>de</strong> a été m<strong>en</strong>ée avec les particules n%SS mais ne conduit<br />
pas à <strong><strong>de</strong>s</strong> résultats probants du fait du nombre limité <strong>de</strong> particules internalisées observables <strong>en</strong><br />
microscopie à fluoresc<strong>en</strong>ce après 24 heures d’exposition.<br />
Une fois l’internalisation mise <strong>en</strong> évi<strong>de</strong>nce, la question qui se pose <strong>en</strong>suite est : que<br />
<strong>de</strong>vi<strong>en</strong>n<strong>en</strong>t les particules internalisées ? Pour répondre à cette question, nous avons exposé les<br />
cellules p<strong>en</strong>dant une semaine aux différ<strong>en</strong>tes particules n%SS. Puis, après rinçage, nous avons<br />
mesuré, par fluoresc<strong>en</strong>ce, l’évolution <strong>de</strong> la quantité <strong>de</strong> particules et <strong>de</strong> formes solubles<br />
excrétées par les cellules. La figure 5.12 représ<strong>en</strong>te ces courbes d’évolution, exprimée <strong>en</strong><br />
pourc<strong>en</strong>tage <strong>de</strong> l’int<strong>en</strong>sité initiale, pour l’<strong>en</strong>semble <strong><strong>de</strong>s</strong> particules n%SS étudiées. La première<br />
constatation est que l’on observe une libération progressive <strong><strong>de</strong>s</strong> particules et <strong><strong>de</strong>s</strong> formes<br />
solubles. Cep<strong>en</strong>dant, plus le taux <strong>de</strong> disulfure augm<strong>en</strong>te plus la quantité <strong>de</strong> <strong>nanoparticules</strong> et<br />
<strong>de</strong> formes solubles excrétées diminue, pour atteindre respectivem<strong>en</strong>t 2 et 4% dans le cas <strong><strong>de</strong>s</strong><br />
particules 40%SS.<br />
En fonction du taux <strong>de</strong> disulfure, on observe <strong>de</strong>ux types <strong>de</strong> comportem<strong>en</strong>t. Soit les cellules<br />
excrèt<strong>en</strong>t majoritairem<strong>en</strong>t <strong><strong>de</strong>s</strong> particules, c’est les cas pour les particules 0%SS et dans une<br />
moindre mesure pour les particules 10%SS pour lesquelles au-<strong>de</strong>là <strong>de</strong> 72 heures les <strong>de</strong>ux<br />
contributions sont similaires, soit les cellules excrèt<strong>en</strong>t plus <strong>de</strong> formes solubles que <strong>de</strong><br />
particules, c’est le cas pour les particules 30%SS et 40%SS. Ceci est <strong>en</strong> accord avec l’étu<strong>de</strong><br />
<strong>de</strong> la réduction <strong><strong>de</strong>s</strong> ponts disulfures par le DTT. En effet, si les ponts disulfures sont réduits <strong>de</strong><br />
façon intracellulaire, les particules peuv<strong>en</strong>t être fragilisées impliquant la production <strong>de</strong> plus <strong>de</strong><br />
formes solubles qui seront pot<strong>en</strong>tiellem<strong>en</strong>t excrétées.<br />
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