Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Chapitre 5 : Nanoparticules de silice pour la libération intracellulaire de principes actifs
5.2.3 BILAN
Cette étude a permis de montrer que l’introduction de ponts disulfures n’a pas d’incidence sur
la dissolution à pH acide. Cette dernière est cependant, comme attendu, ralentie par rapport à
pH 7. Le pH rencontré dans les endosomes puis les lysosomes aura donc comme seul effet de
ralentir la dissolution des particules.
Par contre, la présence de ponts disulfures rend les particules sensibles à un environnement
réducteur. En effet, bien que ce soit un phénomène très étalé dans le temps, on observe
l’oxydation de DTT en présence des particules n%SS, ce qui traduit la réduction des ponts
disulfures, seules espèces dans le milieu capables d’oxyder le DTT. La différence de taux de
disulfure ne modifie pas la réaction sur la première semaine d’étude, par contre au-delà, on
observe une différence de comportement entre les particules possédant plus ou moins de 20%
de disulfures.
5.3 Internalisation des nanoparticules et toxicité
5.3.1 INTERNALISATION ET LOCALISATION INTRACELLULAIRE
Lorsqu’on suit l’internalisation des particules n%SS dans les cellules exposées à une
suspension à 0,6 mg/mL dans du milieu de culture, on constate que l’introduction de ponts
disulfures modifie le processus. En effet, lorsqu’on regarde les cellules 24 heures après l’ajout
des particules, on observe des particules 0%SS internalisées (figure 5.8 a). Lorsqu’on
introduit des ponts disulfures, pour un taux de 10% il semble y avoir quelques poches
d’internalisation des particules (figure 5.8 b). Lorsque le taux de disulfure augmente, on
n’observe plus de particules internalisées. Pour des taux de 20% et 30% on observe des
particules en interactions avec la membrane (figure 5.8 c-d), ce qui n’est plus le cas pour les
particules 40%SS (figure 5.8 e). Après une semaine d’exposition, les particules sans ponts
disulfures sont présentes dans de nombreuses vésicules acides (signal bleu cyan dû à la
colocalisation de la FITC et du Lysosensor, figure 5.8 f). Les particules incorporant des ponts
disulfures, quant à elles, sont visualisées dans des vésicules acides mais en nombre plus
restreint que les particules 0%SS (figure 5.8 g-j).
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