Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...
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tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013<br />
Chapitre 4 : Diffusion <strong><strong>de</strong>s</strong> <strong>nanoparticules</strong> <strong>de</strong> <strong>silice</strong> dans un hydrogel <strong>de</strong> collagène<br />
En conclusion, quelle que soit la conc<strong>en</strong>tration <strong>en</strong> collagène, <strong>en</strong>tre 1,5 et 5 mg/mL, les<br />
particules Si+60 sont internalisées, après 24 h, dans les cellules immobilisées. De même,<br />
l’<strong>en</strong>semble <strong><strong>de</strong>s</strong> particules Si+200, Si+60, Si+10 et Si-10 sont internalisées par un mécanisme<br />
d’<strong>en</strong>docytose active dans les cellules immobilisées dans un gel <strong>de</strong> collagène à 3 mg/mL.<br />
L’immobilisation <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules dans un gel <strong>de</strong> collagène ne semble pas modifier le mécanisme<br />
d’internalisation <strong><strong>de</strong>s</strong> particules <strong>de</strong> plus <strong>de</strong> 60 nm <strong>de</strong> diamètre, internalisées par voie clathrine<br />
dans les cellules immobilisées dans un gel comme dans les cellules <strong>en</strong> exposition directe aux<br />
<strong>nanoparticules</strong> (chapitre 3 § 3.1.1). Par contre, dans le cas <strong><strong>de</strong>s</strong> particules <strong>de</strong> 10 nm <strong>de</strong><br />
diamètre, l’immobilisation <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules semble modifier le processus d’internalisation, mais<br />
ces résultats nécessit<strong>en</strong>t une étu<strong>de</strong> plus approfondie pour être confirmés. Dans tous les cas, on<br />
obti<strong>en</strong>t une colocalisation importante <strong>de</strong> la fluorescéine et du Lysos<strong>en</strong>sor, indiquant la<br />
prés<strong>en</strong>ce <strong><strong>de</strong>s</strong> particules dans <strong><strong>de</strong>s</strong> vésicules aci<strong><strong>de</strong>s</strong>.<br />
- Toxicité <strong><strong>de</strong>s</strong> particules lors <strong>de</strong> leur diffusion dans les gels cellularisés<br />
L’analyse par microscopie à fluoresc<strong>en</strong>ce <strong><strong>de</strong>s</strong> gels a montré que les particules sont<br />
internalisées dans les cellules, il est donc important <strong>de</strong> savoir si cette internalisation perturbe<br />
les cellules <strong>en</strong> induisant une certaine toxicité. Le suivi <strong>de</strong> l’activité métabolique <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules<br />
immobilisées dans les gels <strong>de</strong> collagène montre que lors <strong>de</strong> la diffusion <strong><strong>de</strong>s</strong> différ<strong>en</strong>tes<br />
<strong>nanoparticules</strong>, aucune toxicité notable n’est observée (figure 4.14 b). L’exposition aux<br />
<strong>nanoparticules</strong> diffusant dans le gel <strong>en</strong>traîne plutôt une augm<strong>en</strong>tation <strong>de</strong> l’activité<br />
métabolique, notamm<strong>en</strong>t après 14 jours d’exposition. Cette augm<strong>en</strong>tation est la plus<br />
importante dans le cas <strong><strong>de</strong>s</strong> particules Si-10. De plus, le suivi du nombre <strong>de</strong> cellules vivantes<br />
(obt<strong>en</strong>u après hydrolyse du gel) montre que les particules positives ont un effet bénéfique<br />
(Si+60, Si+10) ou neutre (Si+200) sur le nombre <strong>de</strong> cellules après 7 jours tandis que les<br />
particules négatives Si-10 ont un effet néfaste sur les premières 72 h, effet qui s’estompe<br />
légèrem<strong>en</strong>t au bout <strong>de</strong> 7 jours (figure 4.14 a). En corrélant ces <strong>de</strong>ux étu<strong><strong>de</strong>s</strong>, on peut expliquer<br />
l’augm<strong>en</strong>tation <strong>de</strong> l’activité métabolique <strong><strong>de</strong>s</strong> cellules exposées à la diffusion <strong><strong>de</strong>s</strong> particules Si-<br />
10 comme une réponse à une situation <strong>de</strong> stress.<br />
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