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Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

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tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013<br />

Chapitre 4 : Diffusion <strong><strong>de</strong>s</strong> <strong>nanoparticules</strong> <strong>de</strong> <strong>silice</strong> dans un hydrogel <strong>de</strong> collagène<br />

Figure 4-3 : Images <strong>de</strong> MEB <strong><strong>de</strong>s</strong> gels à 3 mg/mL (H3) et 5 mg/mL (H5)<br />

4.1.2 LE SYSTEME DE DIFFUSION<br />

Afin d’étudier la diffusion <strong><strong>de</strong>s</strong> particules à travers les gels <strong>de</strong> collagène, ces <strong>de</strong>rniers ont été<br />

coulés dans <strong><strong>de</strong>s</strong> inserts <strong>de</strong> culture possédant une membrane poreuse (figure 4.2). Le volume<br />

<strong><strong>de</strong>s</strong> gels a été ajusté pour permettre d’avoir une épaisseur <strong>de</strong> 2 mm, épaisseur r<strong>en</strong>contrée dans<br />

le <strong>de</strong>rme. Après une nuit dans l’incubateur à 37°C avec 5% <strong>de</strong> CO2, les particules<br />

fluoresc<strong>en</strong>tes (Si+200, Si+60, Si+10 et Si-10) <strong>en</strong> susp<strong>en</strong>sion dans le <strong>milieu</strong> <strong>de</strong> culture (0,6<br />

mg/mL) ont été placées au-<strong><strong>de</strong>s</strong>sus du gel et leur diffusion a été quantifiée par mesure <strong>de</strong> la<br />

fluoresc<strong>en</strong>ce <strong>en</strong> sortie du gel.<br />

Afin d’avoir accès à la dissolution <strong><strong>de</strong>s</strong> particules au sein du gel, il est nécessaire <strong>de</strong><br />

différ<strong>en</strong>cier <strong>en</strong> sortie du gel la fluoresc<strong>en</strong>ce due aux particules <strong>de</strong> celle <strong><strong>de</strong>s</strong> formes solubles.<br />

Pour ce faire, le <strong>milieu</strong> prélevé <strong>en</strong> sortie du gel a été analysé directem<strong>en</strong>t (fluoresc<strong>en</strong>ce totale)<br />

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