Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
Chapitre 3 : Interactions des nanoparticules avec les cellules
interactions nanoparticules-cellules (NHDF) à concentration massique en nanoparticules
constante.
De plus, on peut noter que les particules Si-10 causent plus de dommages que les particules
Si+10. Cependant, il faut se souvenir que dans le milieu de culture, les particules s’entourent
d’une couronne de protéines qui modifie leur charge de surface globale (cf chapitre 2) ainsi
que la nature chimique de la surface. Les particules Si+10 sont globalement neutres dans le
milieu de culture tandis que les particules Si-10 sont réellement négatives, ce qui entraîne des
interactions différentes avec la membrane cellulaire, elle-même chargée négativement. Ces
observations sont en accord avec d’autres études qui montrent que le greffage d’amines en
surface des particules de silice diminue leur toxicité (Chang 2007, Yamashita 2011).
Enfin, une observation importante de cette étude est la diminution du signal de la FITC
intracellulaire, résultat d’une libération des particules et/ou de fluorescéine obtenue par
dissolution intracellulaire des particules. L’exocytose de nanoparticules de silice a déjà été
rapportée (Stayton 2009, Hu 2011), mais sans forcément tenir compte de leur possible
dissolution intracellulaire. C’est pour tenter de mieux connaître le devenir à long terme des
ces particules que l’étude a été poussée plus loin.
3.3 Devenir à long terme des particules internalisées
Après une semaine d’exposition aux nanoparticules, les cellules ont été rincées et du milieu
de culture neuf ajouté afin de poursuivre la culture cellulaire. Sur cette période, les
nanoparticules observées seront les nanoparticules internalisées, ou celles libérées par la
cellule. Cependant on ne peut pas exclure la présence de nanoparticules non internalisées mais
en interaction forte avec la membrane cellulaire et qui de ce fait ne seraient pas éliminées par
les rinçages. Les observations en microscopie (fluorescence et électronique) ont été limitées
aux cellules exposées aux particules Si+200 et Si+60 à cause du nombre très restreint de
cellules encore présentes après une semaine d’exposition aux particules de 10 nm de diamètre.
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