Comportement des nanoparticules de silice en milieu biologique ...

tel-00836093, version 1 - 20 Jun 2013
CHAPITRE 4: DIFFUSION DES NANOPARTICULES DE SILICE DANS UN HYDROGEL DE
COLLAGENE 109
4.1 PRESENTATION DU SYSTEME D’ETUDE 110
4.1.1 Le matériau modèle du derme 110
4.1.2 Le système de diffusion 112
4.1.3 Le modèle de diffusion 113
4.1.4 Description d’une courbe type de diffusion et des paramètres résultant de son analyse 115
4.2 INFLUENCE DE DIFFERENTS PARAMETRES 116
4.2.1 Quelle est l’influence de la taille et de la charge de surface des nanoparticules? 116
4.2.2 Influence de la concentration en collagène et de la structure du gel sur la diffusion 123
4.2.3 Quel(s) role(s) jouent les cellules? 128
4.2.4 Bilan sur l’influence de différents paramètres sur la diffusion 138
4.3 ETUDE DES MATERIAUX COMPOSITES COLLAGENE-SILICE 140
4.3.1 Formation des matériaux 141
4.3.2 Etude de l’adhésion / proliferation de fibroblastes sur ces matériaux 141
4.3.3 Bilan sur les matériaux composites collagène-­‐silice 146
4.4 CONCLUSIONS SUR LA DIFFUSION DE NANOPARTICULES DE SILICE DANS DES HYDROGELS DE COLLAGENE
147
CHAPITRE 5: NANOPARTICULES DE SILICE POUR LA LIBERATION INTRACELLULAIRE DE
PRINCIPES ACTIFS 149
5.1 ETUDE DE LA STRUCTURE DES PARTICULES N%SS PAR RMN DU SOLIDE 151
5.1.1 Condensation, intégrité du disulfure et mobilité des espèces : résultats des expériences de
polarisation croisée 151
5.1.2 Répartition des silanes dans les particules : expériences de corrélation hétéronucléaire 155
5.1.3 Bilan sur la structure des particules 157
5.2 COMPORTEMENT DES NANOPARTICULES EN ENVIRONNEMENT CELLULAIRE MIME 157
5.2.1 Influence d’un pH acide sur la dissolution 157
5.2.2 Influence de l’environnement reducteur 158
5.2.3 Bilan 161
5.3 INTERNALISATION DES NANOPARTICULES ET TOXICITE 161
5.3.1 Internalisation et localisation intracellulaire 161
5.3.2 Toxicité des particules n%SS 166
5.3.3 Exocytose et dissolution intracellulaire 167
5.3.4 Bilan sur l’interaction des particules avec les cellules 170
5.4 LIBERATION D’UN MARQUEUR FLUORESCENT 171
5.4.1 Caractérisation des particules incorporant le marqueur Hoechst 33258 171
5.4.2 Libération du marqueur Hoechst 33258 des particules de silice 172
5.4.3 Influence des ponts disulfures sur la liberation 174
5.4.4 Bilan sur l’utilisation des particules de silice pour la libération de molécules encapsulées
176
5.5 CONCLUSIONS SUR LES PARTICULES N%SS ET LEUR APPLICATION POUR LA LIBERATION DE PRINCIPES
ACTIFS 176
CHAPITRE 6: PROTOCOLES EXPERIMENTAUX 179
6.1 SYNTHESE ET CARACTERISATION DES NANOPARTICULES DE SILICE 180
6.1.1 Synthèse 180
6.1.2 Caractérisation des nanoparticules synthétisées 183
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