International Journal of Mediterranean Ecology - Ecologia ...

s’anastomosent donnant des boucles tridimensionnelles
accompagnées de sécrétions
adhésives (Namouchi 1986).
L’objectif du présent travail est de comparer
deux souches de champignons prédateurs du
genre Monacrosporium provenant de deux
régions différentes en étudiant leur morphométrie
et leur efficacité de capture vis-à-vis
de Tylenchulus semipenetrans et Meloidogyne
javanica, deux nématodes phytoparasites.
Matériels et méthodes
Étude morphologique
Comparaison morphologique de deux souches de Monacrosporium salinum, champignon prédateur de nématode,
isolées d’un agro-écosystème tunisien et omanais
Les deux souches faisant l’objet de cette étude
appartiennent à l’espèce M. salinum. Elles
proviennent de deux régions différentes et
présentent des caractéristiques abiotiques distinctes
(Kallel et al. 2008). Ces caractéristiques
sont présentées dans le tableau 1. La
première souche provient du sud tunisien
(Tozeur), maintenue depuis 1984 sur milieu
gélosé CMA à une température de 22 o C et a
fait l’objet d’un brevet d’invention SN 93106.
La seconde souche a été isolée à Oman en
2003 et est maintenue sur le même milieu et
à la même température. Le milieu de culture
Corn Meal Agar (CMA) (8,5 g de Corn Meal
Agar et de 8,5 g d’agar par litre d’eau distillée)
est préparé en le faisant bouillir puis stérilisé
en l’autoclavant à 120 o C pendant
20 minutes. Les deux souches de M. salinum
provenant de Tunisie et du sultanat d’Oman
sont déposées sous le code de MST84 et
MSO03 respectivement dans la collection de
l’Institut national agronomique de Tunisie.
Les deux souches du champignon prédateur
sont repiquées sur milieu CMA (Difco Laboratories,
Detroit MI 48232-7058, États-Unis)
en prélevant, sous loupe binoculaire et dans
une hotte à flux laminaire, une conidie avec
une aiguille portant à son extrémité un bout
de gélose. Après quelques jours, le champignon
envahit toute la boîte.
La technique de coloration permet l’étude
morphologique des deux souches de champignons
provenant de cultures dans les conditions
expérimentales. Les champignons sont
cultivés à partir d’une conidie sur milieu CMA
à la température optimale de croissance apicale.
Après trois jours d’incubation, un bout
de gélose d’une culture de chaque souche de
champignon est déposé sur une lame avec une
goutte de bleu coton avant d’être couvert par
ecologia mediterranea – Vol. 38 (1) – 2012
une lamelle (Nabil 1993). La lame est ensuite
déposée sur une plaque légèrement chauffée
afin de faire fondre la gélose. Ainsi, les lames
sont prêtes pour l’observation sous microscope.
Les caractéristiques biométriques des
deux souches ont été examinées, mesurées et
dessinées à l’aide d’un microscope Orthoplan
Leitz pourvu d’une chambre claire. Ces caractères
concernent essentiellement les mensurations
des conidies, la largeur des hyphes
mycéliens et le diamètre des chlamydospores.
Le nombre de répétitions a été fixé à cinquante
afin de mieux cerner la différence
entre les deux souches.
Mesure de la croissance apicale
Après repiquage monospore des deux souches
de champignons nématophages au milieu
d’une boîte de Pétri contenant un milieu CMA,
cinq boîtes de Pétri pour chaque souche sont
mises en incubation à 30 o C, l’optimum de
leur croissance apicale (Kallel et al. 2008). La
croissance apicale du mycélium est mesurée
de part et d’autre du bord de la colonie chaque
jour. Pour évaluer la compétition intraspécifique
entre les souches du champignon prédateur
de nématode, deux conidies sont inoculées
ensemble sur milieu CMA de part et
d’autre de l’axe de la boîte de Pétri puis mises
à incuber à la même température de 30 o C
pendant une semaine. L’essai a comporté également
cinq répétitions.
Efficacité de capture
des deux souches
L’efficacité de piégeage des deux souches est
évaluée in vitro à 25 o C sur milieu CMA. La
technique consiste à inoculer des boîtes contenant
les souches du champignon avec Meloidogyne
javanica (Treub) Chitw. ou Tylenchulus
semipenetrans Cobb. Chaque boîte est
inoculée avec 100 larves de nématodes. Le
suivi du taux de capture se fait toutes les
24 heures. Pour obtenir les juvéniles, les
Tableau 1 – Caractéristiques abiotiques de l’origine des deux souches MST84
et MSO03 de Monacrosporium salinum.
Table 1 – Abiotic caracterstic of two strains origin MST84 and MSO03 of
nematode trapping fungi Monacrosporium salinum.
Caractéristiques édaphiques Souche MST84 Souche MSO03
Température 15 < T o < 25 o C 25 < T o < 45 o C
Salinité Peu élevée Ec # 3dS/m Très élevée Ec > 5 dS/m
pH Neutre Alcalin
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