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avec des acides et sels divers (acétate d’ammonium, acide acétique, CaCl2…), certains servant de tampon de pH. Les solutions d’EDTA dont l’emploi à été assez tôt normalisé dans différents pays dans le but de formuler des diagnostiques de carence, se montrent rarement adaptées à l’évaluation des teneurs assimilables et de ce fait, conduit rarement à des corrélations entre les teneurs extraites chimiquement et celles dans la plante. - Les solutions salines non tamponnées, comme celles de chlorures ou nitrates de barium, calcium, potassium, magnésium, ou ammonium à des concentrations souvent ≤ 1 mol/L, qui conduisent le plus fréquemment a des corrélations entre les extractions chimiques et les teneurs dans les plantes, notamment pour Cd, Cu ou Zn dans les sols assez contaminés [95]. Nous avons retenu quelques solutions qui semblaient parmi les plus performantes en matière de prédication de la biodisponibilité : KNO3 (0.1 mol/L), NH4NO3 (1mol/L),… (Voir tableau 17). Tableau 17 : les modes opératoires pour la phytodisponibilité des ETM. Agents extractants Prise d’essai Volume de solution Agitation KNO3 0.1 mol/L 1g 05 ml NH4NO3 1mol/L 1g 06 ml MgCl2 1mol/L 1g 10 ml BaCl2 1mol/L 1g 10 ml HNO3 0.1 mol/L 1g 05 ml Agitation continue pendant 1h. Agitation continue pendant 1h.30 mn Agitation continue pendant 1h. Agitation continue pendant 2 h. Agitation continue pendant 1h. HCl 0.1 mol/L 1g 05 ml Agitation continue
CaCl2 0.01mol/L 1g 10 ml EDTA 1g 10 ml c.2- Préparation de la solution EDTA pendant 1h.30mn Agitation continue pendant 2h. Agitation continue pendant 2h. La solution d’EDTA est préparée selon la procédure du Bureau Communautaire des références [76]. La solution d’extraction est obtenue par dissolution à froid de 3,723 g d’EDTA et 77g d’acétate d’ammonium dans 400 ml d’eau ajustée à pH 7 avec un volume de 850 ml à l’aide d’une solution d’ammoniaque ou d’acide acétique puis jaugée à 1000 ml d’eau. La solution obtenue est diluée avec de l’eau distillée dans une fiole d’un litre. Le pH est ajusté à 7 par l’ajout d’ammoniaque ou d’acide chlorhydrique puis le volume est ajusté à 1 litre. II-Les plantes Pour déterminer le taux d’accumulation des ETM dans nos plantes alimentaires, nous avons séparé les différents parties des plantes. A savoir les racines des parties aériennes (tiges et feuilles). II.1-Minéralisation, mise en solution II.1.1-principe Cette méthode est utilisée à tout matériel végétal (racines, tiges et feuilles des trois plantes alimentaires) ou ligneux. La minéralisation est l’opération par laquelle la matière organique est détruite libérant ainsi les matières minérales que l’on peut alors mettre en solution. Il existe deux grands types de procédures : la minéralisation par voie sèche et celle par attaque acide oxydante. Minéralisation par voie sèche : l’échantillon est placé dans un four à moufle et chauffé progressivement jusqu’à 480°C. La matière organique est détruite par combustion. Le résidu est constitué par la cendre minérale. L’opération de minéralisation doit être complétée par mise en solution en milieu acide des cendres obtenues. Cette méthode peut s’adaptée pour
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