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- Pour les deux derniers cas et de leur sœur indemne, au niveau : des produits dermo-cosmétiques (savons, huile de massage abdominal) et antiseptiques. Toutes les cultures directes sont réalisées par platage de 0,1 ml sur gélose de Mueller-Hinton, et sur gélose de Drigalki. Toutes les cultures après enrichissement de 1 ml sont pratiquées sur bouillon trypticase soja. Les cultures sont agitées pendant 24 heures à 37 °C puis cultivées sur géloses au sang de cheval pendant 48 heures à 37 °C. Tous les produits contrôlés sont exempts de S. bovis. En revanche, les prélèvements alimentaires sur sonde gastrique mettent en évidence de nombreux entérocoques. Compte tenu de la difficulté à la fois d'identifier S. bovis en l'absence de test industriel, et de le différencier des entérocoques, la présence de quelques colonies de S. bovis ne peut être formellement exclue. Concernant le lot de lait poolé utilisé par les patients infectés, son analyse bactériologique n'a pas pu être réalisée car la totalité de ce lot avait été consommée. 3.4.2.2 La recherche de portage fécal de S. bovis Elle fût effectuée chez les six patients ayant reçu le même lot de lait poolé provenant du lactarium, ainsi que chez les trois premiers cas. Cette recherche s'est avérée négative. 3.4.2.3 Le typage des souches isolées des cinq hémocultures La comparaison des souches issues des cinq patients par électrophorèse en champ pulsé montre un profil de macro-restriction strictement identique (figures 4 et 5). Les cinq cas ont donc été infectés par le même S. bovis. 70
Figure 4 : Profils d’électrophorèse en champ pulsé des cinq souches de Streptococcus bovis isolées. Les enzymes de restriction utilisées sont SmaI et KspI. colonnes 2-6 : profil ADN des S. bovis avec l’enzyme SmaI ; colonnes 8-12: profil ADN des S. bovis avec l’enzyme KspI ; colonnes 1, 7 et 13: profil ADN du Staphylococcus aureus NCTC 8325 avec l’enzyme SmaI. 8 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Figure 5 : Analyse de gel combiné du profil ADN des cinq Streptococcus bovis isolés. 9 10 SmaI KspI Les analyses moléculaires complémentaires identifient cette souche comme étant Streptococcus gallolyticus subsp. pasteurianus. 71 isolats 1 3 4 5 2
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