UNIVERSITÉ PAUL CÉZANNE, AIX MARSEILLE III - IMEP

Matériel et Méthodes
Tableau 10. Conditions d’élution pour la détection des monomères phénoliques.
Condition Solvant A (%) Solvant B (%) Temps (min)
3.7.10. Les analyses élémentaires : C et N
Les teneurs en C et N, dans les échantillons de culture de L. edodes, ont été déterminées
à l’aide d’un analyseur élémentaire (Flash EA 1212 Elemental Analyzer, France). Les
échantillons ont été finement broyés, pesés et placés dans l’analyseur. L’analyseur a été
calibré avec l’acide aspartique à différentes concentrations.
3.7.11. La résonance magnétique nucléaire 13 C du solide
Les spectres haute résolution ont été réalisés sur le spectromètre Bruker DSX 400 kHz
du Spectropole (Université Paul Cézanne). Les spectres 13 C CP/MAS ont été enregistrés à la
fréquence de 100,7 MHz avec découplage du proton. Environ 300 mg de substrat fermenté
sont placés dans une sonde de 7 mm inclinée à l’angle magique (angle de 54,7° par rapport au
champ magnétique statique) tournant à 6 kHz. Les paramètres d’acquisition utilisés pour un
enregistrement optimal sont une impulsion de 90° pour le proton de 2,8 µs, un délai de
répétition de 3 s, un nombre d’acquisition de 2000, et enfin un temps de contact de 2 ms. La
déconvolution des spectres a été effectuée grâce au logiciel DmFit (Massiot et al., 2002). Le
Tableau 11 et la Figure 14 présentent les principales régions obtenues en RMN du 13 C, et
attribuées aux différents groupes fonctionnels trouvés dans la matière organique des litières et
de compost.
isocratique 80 20 10
linéaire 60 40 15
linéaire 45 65 20
linéaire 25 75 30
linéaire 0 100 45
isocratique 0 100 50
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