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UNIVERSITÉ PAUL CÉZANNE, AIX MARSEILLE III - IMEP

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Matériel et Méthodes<br />

agitation trop violente abîmerait le mycélium et diminuerait aussi sa vigueur. Pour nos<br />

expériences, les substrats ont été inoculés avec différentes quantités d'inoculum (5, 10, et 20<br />

% poids frais) à base d'Ebly® colonisé.<br />

suivante :<br />

3.5. La mise en œuvre des FMS<br />

3.5.1. La préparation du substrat oléicole<br />

La préparation des différents substrats utilisés dans l’étude a été réalisée de la façon<br />

• Le bois de la taille de l’olivier est composé des feuilles et des brindilles et<br />

branches de l’olivier; il a été broyé et tamisé selon la taille des particules désirées.<br />

• Les grignons d’olive ont été mécaniquement homogénéisés.<br />

• Les margines d’olive ont été décongelées juste avant leur utilisation, et<br />

conservées à 4°C pendant une semaine.<br />

Apres l’homogénéisation du bois de la taille avec les grignons d’olive selon différentes<br />

portions, le mélange a été humidifié avec les margines à différentes concentrations (25-50-75-<br />

100%). On a autoclavé, par la suite, l’ensemble des mélanges à 121°C pendant 30 min.<br />

L’humidité du substrat utilisé pour la FMS a été fixée à 50% (p/p).<br />

3.5.2. Les cultures en Erlenmeyer<br />

Des Erlenmeyers de 250 mL ont été remplis avec 45 g de substrat solide à une humidité<br />

de 50 %. Ces flacons ont été stérilisés par autoclavage pendant 30 min à 121°C. L’inoculation<br />

a été réalisée avec 5 g de spawn en mélangeant délicatement l’ensemble pour assurer une<br />

répartition homogène du spawn dans le substrat.<br />

3.5.3. Les cultures en colonnes de Raimbault<br />

Les cultures en FMS ont été réalisées en utilisant les colonnes décrites par Raimbault et<br />

Alazard (1980). Pour nos expériences, nous avons utilisé des colonnes de verre de deux<br />

dimensions différentes 20 et 40 cm de hauteur et de 2 cm de diamètre avec un volume utile de<br />

100 mL pour les substrats céréales et de 250 mL pour le substrat oléicole. Après l’autoclavage<br />

(121°C pendant 20 min) des colonnes préparées vides, elles ont été remplies avec le substrat<br />

solide inoculé. Les colonnes remplies ont été placées dans le dispositif FMS équipé d’un bain<br />

thermostaté à 25±2°C.<br />

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