UNIVERSITÉ PAUL CÉZANNE, AIX MARSEILLE III - IMEP

Matériel et Méthodes
b) Traitement thermique. Pour éviter toute contamination du substrat par d’autres
communautés microbiennes compétitrices, deux procédés de traitement sont utilisés:
i) La stérilisation élimine tous les microorganismes présents dans le substrat. Elle est
utilisée pour les substrats fortement supplémentés. Le substrat est conditionné dans des sacs
plastiques et stérilisé en autoclave à 121°C pendant 1 heure.
ii) La pasteurisation consiste à maintenir dans le substrat une température constante,
autour de 65°C pendant au moins 24 h.
c) Inoculation ou lardage. L’inoculation avec le blanc (spawn) est une étape très
importante de la culture. Pour les substrats stérilisés, l’inoculation s’effectue dans un local
stérile avec de l’air filtré. Par contre, pour un substrat pasteurisé, le substrat peut être inoculé
juste dans un endroit propre. Le taux d’inoculation varie en fonction du procédé thermique
utilisé, du substrat, et de la souche. En général un apport de 3 à 10% est pratiqué (Royse et
Sanchez-Vazquez, 2001; Zhang et al., 2002; Royse et Sanchez-Vazquez, 2003).
d) Incubation. Les conditions nécessaires pour le développement du mycélium sont la
température, l’oxygénation et les périodes d’éclairage. Ce dernier est indispensable durant la
période de formation des sporophores. La durée d’incubation varie entre 1 et 3 mois selon la
souche utilisée et la nature du substrat (Philippoussis et al., 2001; Philippoussis et al., 2003;
Royse et Sanchez-Vazquez 2007; Shen et al., 2008).
e) Induction de fructification. Apres l’envahissement total du substrat, le mycélium
forme de petites agrégations à l’origine des primordia. A ce stade, il faut enlever le sac
plastique et placer le bloc dans une sale éclairée, humidifiée (85-90%) et à une température
entre 15-18°C. L’application d’un choc thermique est pratiquée pour certaines souches.
f) Production et récolte. Durant la fructification, les conditions d’induction sont
maintenues. La maturité des carpophores est atteinte après 10-15 jours de leur apparition.
2.3.3.3. Culture sur substrats alternatifs
Dans la littérature, plusieurs formules de substrats ont été testées pour remplacer la
culture de L. edodes sur les buches. La sciure de bois de chêne a été utilisée pour la culture de
base de L. edodes (Levanon et al., 1993; Royse et Sanchez-Vazquez 2007). Par ailleurs des
substituts du bois, riches en lignocellulose, permettant un meilleur rendement en L. edodes ont
été testés (Zervakis et al., 1996; Curvetto et al., 2002a,b; Özçelik et Peksen 2007).
La formulation des substrats dédiés à la culture de L. edodes nécessite de tenir compte
de leur composition chimique. La composition des résidus lignocellulosiques varie selon leur
nature et leur structure. Ainsi, la teneur en lignine est un facteur qui limite la croissance des
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