UNIVERSITÉ PAUL CÉZANNE, AIX MARSEILLE III - IMEP

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Figure 7. Processus général de culture de L. edodes sur bûches. 2.3.3.2. Culture sur substrats synthétiques Matériel et Méthodes A cause de la limitation géographique du chêne, bois sur lequel se développe naturellement L. edodes, différents substrats agricoles synthétiques ont été testés pour la production de L. edodes (Philippoussis et al., 2000 ; 2001). Parmi les avantages de cette technique, on trouve la possibilité d’utiliser des sous-produits de l’agriculture et des industries agroalimentaires, la réduction du temps de culture, l’augmentation de l’efficience biologique et la possibilité d’avoir une production indépendante des conditions climatiques (Mata, 1997). Mais ce processus de culture nécessite des installations sophistiquées, une bonne maitrise de la technologie et de la biologie du champignon. Les étapes de la culture sont les suivantes (Mata, 1997) : a) Préparation du substrat. Le substrat pour la culture de L. edodes est obtenu à partir d’un mélange de produits lignocellulosiques, de suppléments nutritifs et d’eau. Le champignon L. edodes est capable de se développer sur une gamme diverse de substrats lignocellulosiques qui ne nécessitent pas de traitement de compostage au préalable. Toutefois, la sciure du bois a été utilisée comme substrat de culture de L. edodes. 21
Matériel et Méthodes b) Traitement thermique. Pour éviter toute contamination du substrat par d’autres communautés microbiennes compétitrices, deux procédés de traitement sont utilisés: i) La stérilisation élimine tous les microorganismes présents dans le substrat. Elle est utilisée pour les substrats fortement supplémentés. Le substrat est conditionné dans des sacs plastiques et stérilisé en autoclave à 121°C pendant 1 heure. ii) La pasteurisation consiste à maintenir dans le substrat une température constante, autour de 65°C pendant au moins 24 h. c) Inoculation ou lardage. L’inoculation avec le blanc (spawn) est une étape très importante de la culture. Pour les substrats stérilisés, l’inoculation s’effectue dans un local stérile avec de l’air filtré. Par contre, pour un substrat pasteurisé, le substrat peut être inoculé juste dans un endroit propre. Le taux d’inoculation varie en fonction du procédé thermique utilisé, du substrat, et de la souche. En général un apport de 3 à 10% est pratiqué (Royse et Sanchez-Vazquez, 2001; Zhang et al., 2002; Royse et Sanchez-Vazquez, 2003). d) Incubation. Les conditions nécessaires pour le développement du mycélium sont la température, l’oxygénation et les périodes d’éclairage. Ce dernier est indispensable durant la période de formation des sporophores. La durée d’incubation varie entre 1 et 3 mois selon la souche utilisée et la nature du substrat (Philippoussis et al., 2001; Philippoussis et al., 2003; Royse et Sanchez-Vazquez 2007; Shen et al., 2008). e) Induction de fructification. Apres l’envahissement total du substrat, le mycélium forme de petites agrégations à l’origine des primordia. A ce stade, il faut enlever le sac plastique et placer le bloc dans une sale éclairée, humidifiée (85-90%) et à une température entre 15-18°C. L’application d’un choc thermique est pratiquée pour certaines souches. f) Production et récolte. Durant la fructification, les conditions d’induction sont maintenues. La maturité des carpophores est atteinte après 10-15 jours de leur apparition. 2.3.3.3. Culture sur substrats alternatifs Dans la littérature, plusieurs formules de substrats ont été testées pour remplacer la culture de L. edodes sur les buches. La sciure de bois de chêne a été utilisée pour la culture de base de L. edodes (Levanon et al., 1993; Royse et Sanchez-Vazquez 2007). Par ailleurs des substituts du bois, riches en lignocellulose, permettant un meilleur rendement en L. edodes ont été testés (Zervakis et al., 1996; Curvetto et al., 2002a,b; Özçelik et Peksen 2007). La formulation des substrats dédiés à la culture de L. edodes nécessite de tenir compte de leur composition chimique. La composition des résidus lignocellulosiques varie selon leur nature et leur structure. Ainsi, la teneur en lignine est un facteur qui limite la croissance des 22
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