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UNIVERSITÉ PAUL CÉZANNE, AIX MARSEILLE III - IMEP

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Résultats et discussion. Chapitre 4: Transformation de la matière organique<br />

2.2. Microorganisme et préparation du spawn<br />

Une souche de L. edodes Le119 a été préalablement sélectionnée pour sa capacité de<br />

dégradation des polyphénols des margines (Lakhtar et al., 2009). La souche a été<br />

régulièrement repiquée sur un milieu PDA contenant 10% des margines. Le blanc spawn a été<br />

préparé sur les gains de blé contenant 10% de margines (Chapitre 3). La préparation du spawn<br />

a été effectuée dans les colonnes de Raimbault et l’incubation a été faite à 25°C pendant 10<br />

jours.<br />

2.3. Préparation des substrats SOS<br />

Le substrat a été préparé de la même façon précitée (Chapitre 4). Les grignons d’olive ont été<br />

homogénéisés mécaniquement, à l’aide d’un mixeur, tandis que le bois de taille a été broyé et<br />

tamisé à une taille de particule comprise entre 2 mm et 0,8 mm. Les particules ayant avec une<br />

taille inférieure à 0,8 mm ont aussi été utilisées dans la composition du substrat représentant<br />

30% du poids total du bois de taille. Les substrats ont été mélangés avec les margines et<br />

chauffés pour assurer l’absorption totale de margines. Le mélange (SOS) a été stérilisé à<br />

121°C pendant 30 min.<br />

2.4. Inoculation sur mélange composite pour L. edodes<br />

L’inoculation a été faite à raison de 10% (poids humide : poids humide), et le remplissage des<br />

colonnes a été fait en alternant des couches de substrat et de spawn, pour assurer une<br />

croissance homogène du mycélium. Les colonnes ont été incubées dans l’étuve sans aération<br />

forcée à 25°C pendant 2 jours. Elles ont été, par la suite, placées dans le dispositif de la FMS<br />

pour une durée d’incubation d’un mois. Deux colonnes témoins non inoculées ont été<br />

préparées et incubées dans les mêmes conditions.<br />

2.5. Montage du système de FMS<br />

Les colonnes ont été placées dans un bac rempli d’eau maintenue à 25°C ; l’air traversant le<br />

substrat a été humidifié 3 fois pour arriver à une humidité saturante de l’air. Le débit d’air a<br />

été réglé avec des microvannes et régulièrement ajusté à 20 mL.min -1 . La Figure 4 montre le<br />

fonctionnement du système. La fermentation a été suivie pendant 30 jours.<br />

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