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(Thèse partie 1)

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Matériel et Méthodes<br />

doubles brins d’ADN sont portés à 100 °C pendant 10 minutes puis placés immédiatement<br />

sur la glace pendant 10 minutes. Chaque puit de la plaque de streptavidine reçoit un<br />

aliquote de 200 µl du contenu des eppendorfs de la courbe d’étalonnage, de ceux des<br />

surnageants de simples ou doubles brins d’ADN. On ajoute 4 l d’albumine 10 % (p/v).<br />

On incube à température ambiante avec agitation pendant 2 heures. Les étapes de<br />

détection, de révélation et de lecture dans le lecteur d’ELISA sont faites comme<br />

précédemment.<br />

La lecture de l’absorbance effectuée à 405 nm permet de tracer la courbe étalon de la<br />

densité optique en fonction de la concentration en ADN marqué.

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