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(Thèse partie 1)

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65<br />

Matériel et Méthodes<br />

Les milieux solides à pH 7,0 contenant des concentrations finales variables en NaCl<br />

de 0,0 ; 2,5 ; 5,0 ; 7,5 ; 10,0 ; 12,5 ; 15,0 ; 17,5 ; 20,0 ; 25,0 et 30,0 % (p/v) (Colwell et al.,<br />

1979). L’exigence minimale en Mg 2+ est réalisée sur milieu solide additionné de quantités<br />

variables de MgCl2 : 0 ; 0,005 ; 0,1 ; 0,2 ; 0,4 ; 0,6 ; 0,8 et 3,2 % (p/v) (Rodriguez-Valera<br />

et al., 1983). L’incubation des boites est faite à 37°C.<br />

Température<br />

L’incubation des milieux solides à pH 7,0 ensemencés a lieu à 4 ; 22 ; 30 ; 37 ; 40 ;<br />

50 ; 55 et 60°C (Rodriguez-Valera et al., 1980)<br />

pH<br />

L’intervalle de pH de croissance a été déterminé par ensemencement de milieux<br />

gélosés, sans tampon (pH varie de 4,8 à 5,0), additionné de 50 mM de tampon MOPS (pH<br />

de 6,0 à 7,0), de HEPES (pH de 7,5 à 8,0) et de Tris (pH de 8,0 à 9,0) (Stan-Lotter et al.,<br />

2002).<br />

Utilisation de substrats carbonés<br />

Les milieux solides précédents dépourvus de toute source organique, additionnés de<br />

NH4Cl (0,5 g.l -1 ), de KH2PO4 (0,005 g.l -1 ), de tampon et dont le pH a été ajusté à 7,0. Les<br />

substrats sont rajoutés à une concentration finale de 1 % pour les sucres et 0,1 % pour les<br />

alcools, les acides organiques et les acides aminés (Oren et al., 1997).<br />

Glucose, lactose, xylose, galactose, fructose, arabinose, mannose, rhamnose, maltose,<br />

saccharose, amidon, salicine, cellulose, adonitol, dulcitol, glycérol, mannitol, sorbitol,<br />

inositol, propionate, oxalate, acétate, succinate, malonate, benzoate, malate, formiate,<br />

fumarate, lactate, citrate, arginine, alanine, asparagine histidine, leucine, cystine, glycine,<br />

tryptophane, tyrosine et méthionine.<br />

Production d’acides à partir de substrats carbonés

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