(Thèse partie 1)

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Matériel et Méthodes
gélose inclinée à 4°C pendant trois mois ou en milieu liquide contenant 10 à 15 % de
glycérol à – 80°C (Tindall, 1992).
2. 4. Souches de référence
Les souches types archéennes et bactériennes utilisées lors de ce travail sont
répertoriées dans le Tableau 6. Leur culture a été faite sur le milieu HE de Torreblanca et
al. (1986) à concentration saline finale de 25 % (p/v) et supplémenté de 0,1 % (p/v) de
glucose (Tableau 5-Annexe 3).
3. Identification des souches purifiées
L´identification des souches est faite sur la base des tests proposés par Oren et al.
(1997) pour la description de nouveau taxon dans l´ordre des Halobacteriales.
3. 1. Caractérisation morphologique des souches et de leurs colonies
L’aspect macroscopique est déterminé sur milieu solide spécifique pour chaque
souche après 5 jours d’incubation à 37°C. La coloration de Gram a été effectuée selon la
technique modifiée par Dussault (1955) par application, après fixation, d’une solution
d’acétate à 2 % (v/v) pendant 5 minutes.
Pour la coloration négative, une goutte d’une culture en croissance exponentielle est
déposée sur une grille de cuivre. Après séchage, la préparation est colorée par une solution
d’acétate d’uranyle (2 % dans l’eau distillée) durant 1 minute. Après séchage de 10
minutes à température ambiante, les grilles sont observées à l’aide d’un microscope
électronique en transmission Zeiss EM 902 à 60 kV.