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(Thèse partie 1)

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Revue bibliographique<br />

classifications parallèles basées sur des critères morphologiques seront établies. Il faudra<br />

attendre 1923 pour qu’apparaissent la première classification bactérienne, le Bergey’s<br />

Manual of Determinative Bacteriology compilant les résultas de toutes les études menées<br />

auparavant.<br />

Le développement de la taxinomie numérique et des approches polyphasiques ou mixtes et<br />

surtout l’apparition de la taxinomie moléculaire (en particulier l’analyse de l’ARN<br />

ribosomal ou des gènes codant pour l’ARNr (ADNr) ont permis de redonner un véritable<br />

élan à cette discipline.<br />

6. 3. L’approche non culturale<br />

6. 3. 1. Les techniques de quantification<br />

La quantification des microorganismes peut se faire soit directement soit<br />

indirectement après marquage d’un constituant cellulaire donné par un chromophore et<br />

observation en microscopie à épifluorescence. Des comptages cellulaires directs à partir<br />

d’échantillons naturels sont réalisés sous le microscope en utilisant des cellules de<br />

comptage. Des comptages cellulaires peuvent également être effectués après marquage<br />

direct des acides nucléiques ou des constituants cellulaires à l’aide d’un fluorophore<br />

(DAPI, acridine orange, etc.) ou marquage indirect à l’aide d’anticorps marqué ou d’une<br />

sonde fluorescente qui se fixera de façon spécifique sur la cible.<br />

Des techniques culturales sont classiquement utilisées en quantification telles que la<br />

technique du NPP (Nombre le Plus Probable) en milieu liquide et la méthode UFC (Unités<br />

Formant Colonie) sur milieu solide. Elles permettent de dénombrer les bactéries<br />

cultivables.<br />

6. 3. 2. Les biomarqueurs cellulaires<br />

En dehors des acides nucléiques, les microorganismes comportent d’autres structures<br />

pouvant servir de biomarqueurs de taxons. Les biomarqueurs incluent des transporteurs de<br />

la chaîne respiratoire (quinone…), des pigments, des constituants de la paroi (acide<br />

muramique) et des lipides membranaires.

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