TSQ Series

1 Introduction
Parmi ces trois modes, ESI, H-ESI et APCI, lequel convient le mieux à l’analyse des échantillons ?
Parmi ces trois modes, ESI, H-ESI et APCI, lequel convient le mieux
à l’analyse des échantillons ?
Vous pouvez utiliser le spectromètre de masse dans l’un des trois modes d’ionisation à pression
atmosphérique suivants :
• ESI (Electrospray ionization, ionisation par électrospray)
• H-ESI (Heated Electrospray ionization, ionisation par électrospray à chaud)
• APCI (Atmospheric pressure chemical ionization, ionisation chimique à pression atmosphérique)
En général, les modes ESI et H-ESI donnent de meilleurs résultats pour les composés polaires tels que
les amines, les peptides et les protéines. Le mode APCI donne de meilleurs résultats pour les composés
non polaires tels que les stéroïdes.
Les ions d’échantillon peuvent transporter une ou plusieurs charges. Le nombre de charges transportées
par les ions d’échantillon varie en fonction de la structure de l’analyte utilisé, de la phase mobile et du
mode d’ionisation.
Utilisation des modes ESI et H-ESI
Les modes ESI et H-ESI produisent en général des spectres de masse composés d’ions à charge unique.
Toutefois, la charge dépend de la structure de l’analyte et du solvant. Lorsque des ions à charges
multiples sont produits, les spectres de masse peuvent être transformés mathématiquement afin
d’indiquer les masses moléculaires de l’échantillon.
Les modes ESI et H-ESI transfèrent les ions dans la solution en phase gazeuse. Ils permettent d’analyser
n’importe quel échantillon qui ne convenait pas auparavant à une analyse de masse (par exemple, les
composés thermolabiles ou ceux à masse moléculaire élevée). Les modes ESI et H-ESI permettent
d’analyser n’importe quel composé polaire qui produit un ion préformé en solution. L’expression ion
préformé peut s’appliquer aux ions adduits. Par exemple, les glycols polyéthyléniques peuvent être
analysés à partir d’une solution à base d’acétate d’ammonium du fait de la formation d’adduits entre les
ions NH 4 + présents dans la solution et les atomes d’oxygène du polymère. En mode ESI ou H-ESI,
l’instrument TSQ permet d’analyser des composés dont les masses moléculaires sont supérieures à
100000 u en raison de leurs charges multiples. Les modes ESI et H-ESI s’avèrent particulièrement
utiles pour la caractérisation de masses de composés polaires, notamment de polymères biologiques
(par exemple, des protéines, des peptides, des glycoprotéines et des nucléotides), de produits
pharmaceutiques et métabolites associés, et de polymères industriels.
Les modes ESI et H-ESI peuvent être utilisés avec les polarités ions positifs ou ions négatifs. La polarité
des ions préformés en solution détermine le mode de polarité des ions : les molécules acides produisent
des ions négatifs dans une solution à pH élevé, tandis que les molécules basiques forment des ions
positifs dans une solution à pH faible. Une aiguille d’électrospray à charge positive génère des ions
positifs et une aiguille à charge négative génère des ions négatifs.
Vous pouvez modifier le débit du LC vers le spectromètre de masse : il peut être compris entre 1 μl/min
(ou moins) (utilisez une source d’ions par nanospray) et 1 000 μl/min (utilisez les sources ESI et H-ESI
standard). Voir le Tableau 4. Dans le cas de protéines ou de peptides de masse moléculaire supérieure,
le spectre de masse obtenu comprend généralement une série de pics correspondant à une distribution
d’ions analytes à charges multiples.
La taille des gouttelettes, la charge de leur surface, la tension à la surface des gouttelettes, le degré de
volatilité du solvant et la force de solvatation des ions sont des facteurs qui ont une incidence sur les
processus ESI et H-ESI. Les gouttelettes de grande taille avec une tension de surface élevée, une faible
2 Guide de démarrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific