etude de la qualite microbiologique des viandes boucanées ... - L'ENS

le volume ensemencé etalé à l’aide d’une pipette Pasteur coudée. Les boîtes ensemencées sont
incubées à 37°C pendant 24 h, temps au bout duquel les colonies sont dénombrées.
• Dénombrement des coliformes totaux
Cette méthode est basée sur le dénombrement de toutes les entérobactéries viables
fermentant le lactose sur gélose lactosée à l’éosine et au bleu de méthylène (E.M.B.).
L’ensemencement du produit et de ses dilutions a été réalisé en surface à l’aide d’une
micropipette et le volume ensemencé étalé à l’aide d’une pipette Pasteur coudée. Les boîtes
ensemencées sont incubées à 30°C pendant 24 à 36 h temps au bout duquel les colonies
présentant les caractères des coliformes sont dénombrées.
• Recherche des staphylocoques
Elle s’est faite par ensemencement sur milieu de Chapman. Au terme d’une période
d’incubation de 24 à 48h à 37°C, chaque type de colonies bien isolée et présentant les
caractéristiques propres aux staphylocoques est prélevée du milieu pour des épreuves de
confirmation (observation microscopique à l’état frais et après coloration de Gram).
• Recherche des salmonelles
Elle s’est faite en 2 étapes : la présomption sur gélose SS suivie d’une confirmation par
différents tests (observation à l’état frais, coloration de Gram, Test de la catalase).
L’ensemencement a été réalisé en surface sur gélose Salmonella-Shigella. Après incubation,
chaque type de colonies présumées salmonella est prélevée pour des épreuves de confirmation.
• Dénombrement de la flore fongique
L’isolement des moisissures et des levures est réalisé par culture sur gélose PDA modifiée
(Potatoes dextrose agar). Les boites ensemencées sont retournées, puis incubées à 25°C
pendant 36-48h (Refai, 1981).
• Recherche de la flore sporulée totale
Elle a été réalisée par ensemencement sur gélose PCA après traitement de l’homogénat
d’aliment à 80°C pendant 10 min. 100 microlitres de chaque dilution de l’homogénat d’aliment
sont déposés à la surface du milieu PCA préalablement coulé dans les boites de Pétri marquées
et refroidies. La solution déposée est étalée à l’aide d’une pipette pasteur coudée stérile, puis
les boîtes ensemencées sont retournées et incubées à 37°C pendant 24h. Au terme de cette