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Contributions à l'étude de la classification spectrale et applications

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120 Extraction <strong>de</strong> connaissances appliquée <strong>à</strong> <strong>la</strong> biologie <strong>et</strong> l’imagerie médicale<br />

Partie 1 :<br />

C<strong>la</strong>ssification <strong>de</strong> profils temporels<br />

d’expression <strong>de</strong> gènes<br />

Après avoir introduit le contexte <strong>à</strong> travers le cadre <strong>de</strong> l’étu<strong>de</strong> <strong>et</strong> le principe <strong>de</strong>s biopuces, nous<br />

adapterons dans un premier temps une métho<strong>de</strong> basée sur les cartes <strong>de</strong> Kohonen aux données<br />

d’expressions temporelles <strong>de</strong> gènes qui servira par <strong>la</strong> suite d’outil référence <strong>de</strong> comparaison. Dans<br />

un second temps, <strong>la</strong> métho<strong>de</strong> du spectral clustering sera appliquée sur ces mêmes données. Enfin,<br />

les résultats seront comparés dans une <strong>de</strong>rnière partie.<br />

4.1 Présentation du problème biologique<br />

Dans <strong>la</strong> suite, le cadre <strong>de</strong> l’étu<strong>de</strong> sera introduit ainsi que le principe <strong>de</strong>s biopuces ou puces ADN<br />

utilisées pour obtenir l’ensemble <strong>de</strong>s données génomiques.<br />

Cadre <strong>de</strong> l’étu<strong>de</strong><br />

Les légumineuses fixent l’azote atmosphérique en établissant une symbiose avec une bactérie<br />

racinaire (Rhizobium). C<strong>et</strong>te aptitu<strong>de</strong> explique <strong>la</strong> forte teneur en protéines <strong>et</strong> perm<strong>et</strong> <strong>la</strong> synthèse<br />

<strong>de</strong> protéines sans avoir recours <strong>à</strong> une fertilisation azotée chimique. La culture <strong>de</strong>s légumineuses, <strong>à</strong> <strong>la</strong><br />

différence <strong>de</strong>s céréales ou <strong>de</strong>s oléo-protéagineux comme le colza <strong>et</strong> le tournesol,constitue le meilleur<br />

moyen <strong>de</strong> produire <strong>de</strong>s protéines tout en respectant l’environnement.<br />

La légumineuse modèle considérée est le Médicago Truncatu<strong>la</strong> [102]. C<strong>et</strong>te espèce est <strong>la</strong> proche<br />

d’un point <strong>de</strong> vue phylogénétique (i.e étu<strong>de</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> formation <strong>et</strong> <strong>de</strong> l’évolution <strong>de</strong>s organismes vivants<br />

en vue d’établir leur parenté) <strong>de</strong> <strong>la</strong> plupart <strong>de</strong>s légumineuses cultivées en Europe. Elle fait partie<br />

du groupe <strong>de</strong>s galégoï<strong>de</strong>s contenant les tribus <strong>de</strong>s Trifoliées (luzernes, trèfles...), <strong>de</strong>s Viciées (pois,<br />

féveroles, lentilles..) <strong>et</strong> Cicérées (pois chiche...). Le Médicago Truncatu<strong>la</strong> est une luzerne proche<br />

<strong>de</strong> <strong>la</strong> luzerne cultivée (M.sativa). La taille du génome est 450 mégabases (10 6 bases) par cellule,<br />

équivalente <strong>à</strong> celle du riz. Il s’agit d’une espèce diploï<strong>de</strong> (appariement <strong>de</strong>s chromosomes contenus<br />

dans <strong>la</strong> cellule biologique) <strong>et</strong> autogame (autofécon<strong>de</strong>). Le principal inconvénient <strong>de</strong> ces espèces est<br />

sa sensibilité <strong>à</strong> un grand nombre <strong>de</strong> pathogènes surtout racinaires.<br />

Une bactérie connue pour attaquer plus <strong>de</strong> 200 espèces incluant beaucoup <strong>de</strong> cultures <strong>et</strong> <strong>de</strong><br />

récoltes agricoles est le Ralstonia So<strong>la</strong>nacearum. Sa forme en seringue perm<strong>et</strong> une infection par <strong>la</strong><br />

racine <strong>de</strong>s p<strong>la</strong>ntes, véritable autoroute pour les pathogènes. Des expérimentations basées sur l’inoccu<strong>la</strong>tion<br />

<strong>de</strong> <strong>la</strong> bactérie dans le Medicago Truncatu<strong>la</strong> ont dévoilé l’existence <strong>de</strong> p<strong>la</strong>ntes résistantes<br />

(mutant HRP). L’observation <strong>de</strong>s gènes concernés par les ma<strong>la</strong>die foliaire <strong>et</strong> racinaire <strong>et</strong> l’analyse<br />

<strong>de</strong>s gènes issus <strong>de</strong>s p<strong>la</strong>ntes résistantes est nécessaire. On a recours aux puces <strong>à</strong> ADN.<br />

Principes <strong>de</strong>s expériences effectuées<br />

La fabrication <strong>de</strong> puce <strong>à</strong> ADN [94] consiste <strong>à</strong> immobiliser <strong>de</strong> façon ordonnée sur un support<br />

soli<strong>de</strong> <strong>de</strong>s molécules d’ADN, appelés son<strong>de</strong>s, spécifiques <strong>de</strong>s gènes que l’on souhaite étudier comme

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