BIOLOGIE CLINIQUE

L'efficacité d'un procédé de stérilisation dépend également de la contamination initiale. Si le matériel à
stériliser est fortement contaminé, la stérilité ne peut être garantie. La désinfection à la Javel puis le
nettoyage du matériel avant emballage permettent de réduire la contamination initiale.
La stérilisation ne se limite donc manifestement pas à un simple traitement dans un stérilisateur. D'autres
éléments, tels que le nettoyage préalable et l'emballage, doivent donc également entrer en ligne de compte.
On peut stériliser par la chaleur humide : autoclave (ou cocotte-minute), ou par la chaleur sèche : four de
type Poupinel. La stérilisation par la chaleur humide donne de meilleur résultats, est plus rapide, se contente
d'une source de chaleur au gaz (les fours sont électriques) et consomme moins d'énergie. C'est donc ce
procédé que nous conseillons.
STÉRILISATION PAR LA CHALEUR HUMIDE
Introduction :
La stérilisation à la chaleur humide au moyen de vapeur saturée et sous pression constitue le procédé de
stérilisation le plus fiable et le plus facile à contrôler La stérilisation à la vapeur sous pression représente
donc le premier choix pour le matériel qui résiste aux températures et pressions élevées, aux brusques
changements de pression et à l'humidité.
Principe
Le matériel à stériliser est exposé à l'action de la vapeur d'eau saturée et sous pression à des paramètres
temps/température déterminés. les objets à stériliser peuvent être placés sur des grilles, plaques perforées
ou dans des conteneurs perméables à la vapeur, pourvus le cas échéant de matériaux absorbants.
Mode opératoire :
Le matériel à stériliser doit tout d'abord être emballé. On utilise normalement des boîtes en inox à volets. A
défaut, on utilise du papier. Le papier peut être utilisé sous forme de feuilles ou sous forme de sachets. Le
meilleur papier est le papier journal vierge (voir avec les quotidiens locaux pour l'approvisionnement).
Le conditionnement doit être perméable à l'air et à la vapeur. La fonction de protection du conditionnement
et le séchage du matériel ne peuvent être compromis par la condensation.
La stérilisation de tubes en verre de 15 ml (contenant 5 ml d'eau ou de sérum physiologique) ne nécessite
pas d'emballage. après avoir désinfecté puis rincé soigneusement les tubes, les remplir près du bec Bunsen
de 5 ml d'eau déjà filtrée ou de 5 ml de sérum physiologique (préparé avec 1 litre d'eau filtrée et 9 grammes
de sel). Flamber les cols puis les bouchons. Boucher les tubes sans les visser à fond (l'air doit pouvoir
circuler pour éviter une surpression qui ferait exploser les tubes). Les placer verticalement bouchon en haut
dans un panier en métal puis dans l'autoclave (à défaut d'un autoclave, on prend une Cocotte-minute, il
existe cependant des petits autoclaves 8 litres avec manomètre de contrôle de la pression à 2000 FF).
Stérilisation proprement dite :
• Placer les boîte en inox, volets ouverts, ou les paniers contenant les tubes dans l'autoclave
contenant de l'eau (environ 1 litre pour un autoclave de 8 litres, il doit en rester en fin de processus),
boucher hermétiquement.
• L'eau ne doit pas toucher les boîtes ou les tubes. Au besoin, placer 3 ou 4 galets au fond de la
cocotte pour surélever le panier.
• Placer l'autoclave sur la source de chaleur, la soupape d'évacuation étant ouverte. Dès l'apparition
de l'ébullition, diminuer le chauffage pour permettre à l'air et à la vapeur de s'échapper doucement.
• Après une vingtaine de minutes, fermer la soupape d'évacuation de l'air. Augmenter le chauffage et
surveiller le manomètre. En quelque minutes, il atteint 1 bar relatif ou 2 bars absolus.
• Diminuer le chauffage pour maintenir la pression entre 1 et 1.2 bars pendant 20 minutes puis couper
le chauffage.
• Si on veut obtenir en même temps un séchage (valable pour les emballages papier), laisser fuir
rapidement la vapeur par la soupape puis ouvrir l'autoclave dès que la pression est tombée
(attention aux brûlures par la vapeur) et laisser sécher le panier à l'extérieur de l'autoclave.
• Si on stérilise des liquides, laisser la pression tomber sans ouvrir la soupape (pour éviter
l'évaporation du liquide stérilisé). Lorsque la pression est égale à la pression atmosphérique, ouvri
l'autoclave, sortir tubes et bouteilles, serrer les bouchons immédiatement (manipuler avec des gants
épais : attention aux brûlures)