La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
La figure 2 montre que dans le cas des activités phosphatasiques de l’eau de mer la courbe de
l’activité totale est particulière ; en effet au lieu d’obtenir une droite, nous obtenons une
courbe complexe. L’analyse de cette courbe a montré qu’elle résultait de la somme de deux
composantes michaeliennes.
Activité (nmoles MUF/h/l)
25
20
15
10
5
0
0 20 40 60 80
Activité (nmoles MUF/h/l)/MUF-P (µM)
Grâce à un programme d’itérations successives il a été possible de calculer les paramètres
cinétiques (Km et Vmax) de chacune d’elle. La première composante (V1) se caractérise par
un Km de 4,5 µM et une Vmax de 13 nM MUF/h. Pour la deuxième composante (V2) on
obtient un Km de 0,26 µM et une Vmax de 17 nM MUF/h (tableau 1).
Km1 Vm1 Km2 Vm2 Vm1/Km1 Vm2/Km2
Total 4,5 13 0,26 17 2,9 65,4
Particulaire- 0,33 18,5 56,1
Dissous 4 9,5 0,68 0,5 2,4 0,7
Tableau 1: valeurs des constantes michaeliennes (Km en µM et Vm nM MUF/h) pour l'eau de mer, les
fractions particulaires et dissoutes et le rapport Vm/Km.
Les Km des deux types d’activité sont éloignés d’un facteur 20 environ. On peut alors
associer la première composante à une activité à faible affinité car son Km est le plus élevé, et
la seconde composante à une activité à forte affinité car son Km est plus bas.
Les équations de ces deux composantes permettent de calculer, pour chaque concentration de
substrat, la part de chacune d’elle dans l’activité totale (figure 3). On observe ainsi que plus
de 60 % de l’activité est due à la composante à forte affinité. Par ailleurs, lorsque la
concentration en substrat diminue la contribution de la composante à forte affinité augmente
(V2) ; alors que lorsque la concentration en substrat augmente la contribution de la
composante à faible affinité (V1) augmente également.
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Figure 2 : Représentation d’Eadie-Hofstee de
l’activité totale de l’eau de mer.