La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
1. Etude des cinétiques des activités moyennes annuelles
1.1 Cinétique de l’activité totale de l’eau de mer
L’activité totale de l’eau de mer est due à l’activité du matériel particulaire et à l’activité
dissoute.
L’activité totale de l’eau de mer a été étudiée avec les deux substrats : le MUF-P et le pNPP,
dissous dans l’eau de mer. Pour chaque substrat, plusieurs concentrations ont été utilisées :
sept dans le cas du MUF-P (entre 0,013 – 30 µM) et quatre dans le cas du pNPP (10-5-2,5-
1,25 mM).
1.1.1 Avec le MUF-P
La figure 1 représente l’activité annuelle moyenne (en nM MUF/h ou en µM pNPP/h) en
fonction des concentrations en substrat (en µM MUF-P ou en mM pNPP). Elle montre que
l’activité totale se sature progressivement lorsque la concentration en substrat s’élève.
Activité (nmoles MUF/h/l)
30
25
20
15
10
5
0
0 2 4 6 8 10 12
MUF-P (µM)
Dissous Total Particulaire
Les courbes des cinétiques enzymatiques ont ensuite été tracées afin de calculer la constante
de Michaelis-Menten (Km) et la Vmax. Pour ce faire, nous avons utilisé la transformation
d’Eadie-Hofstee pour laquelle on représente l’activité en fonction du rapport entre l’activité et
les concentrations en substrat.
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Figure 1 : Courbes de
Michaelis-Menten de
l’activité moyenne
annuelle Dissoute,
Totale et Particulaire.