La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
Résultats, Chapitre II : Etude des caractéristiques biochimiques de
l’activité phosphatasique
Présentation
Ce chapitre est destiné à présenter les caractéristiques cinétiques (Km et Vmax) de l’activité
phosphatasique de l’eau de mer, du matériel particulaire et de l’activité dissoute. Pour ce faire
nous nous référerons aux moyennes annuelles des activités mesurées sur l’ensemble du cycle.
L’analyse des cinétiques enzymatiques à partir des transformations d’Eadie-Hofstee sera
détaillée dans une première partie. Une deuxième partie sera consacrée à préciser la
localisation cellulaire des activités phosphatasiques du matériel particulaire. Enfin dans une
troisième partie nous étudierons les dépendances de pH des activités particulaires ainsi que
celles des activités dissoutes.
Sommaire
1. Etude des cinétiques des activités moyennes annuelles ..................................................................... 74
1.1 Cinétique de l’activité totale de l’eau de mer................................................................................ 74
1.1.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 74
Avec le pNPP .......................................................................................................................................... 76
1.2 Cinétiques des activités dissoutes.................................................................................................. 77
1.2.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 77
1.2.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 78
1.3 Cinétique des activités particulaires .............................................................................................. 78
1.3.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 79
1.3.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 79
1.4 Comparaison des activités particulaires et dissoutes..................................................................... 80
1.4.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 80
1.4.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 80
2. Mise en évidence des activités intracellulaires et exoenzymatiques.................................................. 81
1.5 Fraction >90 µm............................................................................................................................ 81
1.6 Fraction 0,45-1 µm et 1-90 µm ..................................................................................................... 85
3. Dépendances de pH de l’activité phosphatasique .............................................................................. 85
1.7 Activité dissoute............................................................................................................................ 86
3.1.1 Avec le MUF-P comme substrat .................................................................................................... 86
3.1.2 Avec le pNPP comme substrat ....................................................................................................... 87
1.8 Activité particulaire totale............................................................................................................. 88
3.2.1 Activités de la classe de taille >90 µm .......................................................................................... 88
3.2.2 Activités de la classe de taille 1-90 µm......................................................................................... 90
3.2.3 Activités de la classe de taille 0,45-1 µm....................................................................................... 92
1.9 Activités intracellulaires et exoenzymatiques ............................................................................... 94
3.3.1 Avec le MUF-P comme substrat .................................................................................................... 94
Cas de la fraction >90 µm.................................................................................................................. 94
Cas de la fraction 1-90 µm................................................................................................................. 95
Cas de la fraction 0,45-1 µm.............................................................................................................. 96
3.3.2 Avec le pNPP comme substrat ....................................................................................................... 96
Cas de la fraction >90 µm.................................................................................................................. 96
Cas de la fraction 1-90 µm................................................................................................................. 97
Cas de la fraction 0,45-1 µm.............................................................................................................. 98
4. Résumé.................................................................................................................................................. 98
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