La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...
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tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011<br />
Résultats, Chapitre II : Etude des <strong>caractéristiques</strong> biochimiques de<br />
l’activité phosphatasique<br />
Prés<strong>en</strong>tation<br />
Ce chapitre est destiné à prés<strong>en</strong>ter les <strong>caractéristiques</strong> cinétiques (Km et Vmax) de l’activité<br />
phosphatasique de l’eau de mer, du matériel particulaire et de l’activité dissoute. Pour ce faire<br />
nous nous référerons aux moy<strong>en</strong>nes annuelles des activités mesurées sur l’<strong>en</strong>semble du cycle.<br />
L’analyse des cinétiques <strong>en</strong>zymatiques à partir des transformations d’Eadie-Hofstee sera<br />
détaillée dans une première partie. Une deuxième partie sera consacrée à préciser la<br />
localisation cellulaire des activités phosphatasiques du matériel particulaire. Enfin dans une<br />
troisième partie nous étudierons les dép<strong>en</strong>dances de pH des activités particulaires ainsi que<br />
celles des activités dissoutes.<br />
Sommaire<br />
1. Etude des cinétiques des activités moy<strong>en</strong>nes annuelles ..................................................................... 74<br />
1.1 Cinétique de l’activité totale de l’eau de mer................................................................................ 74<br />
1.1.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 74<br />
Avec le pNPP .......................................................................................................................................... 76<br />
1.2 Cinétiques des activités dissoutes.................................................................................................. 77<br />
1.2.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 77<br />
1.2.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 78<br />
1.3 Cinétique des activités particulaires .............................................................................................. 78<br />
1.3.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 79<br />
1.3.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 79<br />
1.4 Comparai<strong>son</strong> des activités particulaires et dissoutes..................................................................... 80<br />
1.4.1 Avec le MUF-P .............................................................................................................................. 80<br />
1.4.2 Avec le pNPP ................................................................................................................................. 80<br />
2. Mise <strong>en</strong> évid<strong>en</strong>ce des activités intracellulaires et exo<strong>en</strong>zymatiques.................................................. 81<br />
1.5 Fraction >90 µm............................................................................................................................ 81<br />
1.6 Fraction 0,45-1 µm et 1-90 µm ..................................................................................................... 85<br />
3. Dép<strong>en</strong>dances de pH de l’activité phosphatasique .............................................................................. 85<br />
1.7 Activité dissoute............................................................................................................................ 86<br />
3.1.1 Avec le MUF-P comme substrat .................................................................................................... 86<br />
3.1.2 Avec le pNPP comme substrat ....................................................................................................... 87<br />
1.8 Activité particulaire totale............................................................................................................. 88<br />
3.2.1 Activités de la classe de taille >90 µm .......................................................................................... 88<br />
3.2.2 Activités de la classe de taille 1-90 µm......................................................................................... 90<br />
3.2.3 Activités de la classe de taille 0,45-1 µm....................................................................................... 92<br />
1.9 Activités intracellulaires et exo<strong>en</strong>zymatiques ............................................................................... 94<br />
3.3.1 Avec le MUF-P comme substrat .................................................................................................... 94<br />
Cas de la fraction >90 µm.................................................................................................................. 94<br />
Cas de la fraction 1-90 µm................................................................................................................. 95<br />
Cas de la fraction 0,45-1 µm.............................................................................................................. 96<br />
3.3.2 Avec le pNPP comme substrat ....................................................................................................... 96<br />
Cas de la fraction >90 µm.................................................................................................................. 96<br />
Cas de la fraction 1-90 µm................................................................................................................. 97<br />
Cas de la fraction 0,45-1 µm.............................................................................................................. 98<br />
4. Résumé.................................................................................................................................................. 98<br />
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