La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
présentation des résultats. Pour calculer les constantes biochimiques de chacune de ces
composantes, un modèle informatique a été développé basé sur un programme d’itérations
successives. Par ailleurs, nous avons utilisé en parallèle le logiciel Table Curve qui permet
également de résoudre ce type d’équations.
Pour que le calcul des constantes de Michaelis soit précis, il est nécessaire que les mesures
soient pratiquées pendant la phase linéaire d’évolution des quantités de produit formé.
Comme l’activité phosphatasique est inhibée de façon compétitive par les ions orthophosphate
qui peuvent être produits pendant l’hydrolyse de composés phosphorés intracellulaires du
materiel particulaire, les équations des cinétiques enzymatiques ont été remaniées.
La vitesse initiale de la réaction en présence d’inhibiteur se calcule ainsi :
Avec :
S = concentration en MUF-P
Vi = [(Vmi * S) / ( Km((Fi /Kf) + 1) + S)]
Fi = concentration d’inhibiteur initiale (PO4)
Ft = concentration d’inhibiteur à l’instant t
F(t) = facteur d’augmentation de la concentration en inhibiteur en fonction du temps
Kf = constante d’affinité de l’inhibiteur pour l’enzyme
Vmt = vitesse maximale à l’instant t
Vmi = vitesse initiale maximale
À l’instant t on a:
Vt = [(Vmt * S) / ( Km((Ft /Kf) + 1) + S)]
[F] dépend du temps (le PO4 est produit à partir de l’homogénat de façon régulière au cours
du temps) : Ft = Fi * t
La Vm dépend également du temps : Vmt = Vmi * t
On a alors :
On pose:
a = Vmi * S
b = (Km * Fi) / Kf
c = Km + S
V(t) = [(Vmi * S * t) / ( Km((Fi * t) /Kf) + 1) + S)]
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