La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
Etape 2 : libération d’un alcool et formation du complexe covalent « phosphoryl enzyme »
Etape 3 : conversion grâce à une molécule d’eau en un composé non covalent
Etape 4 : relargage de l’ion orthophosphate et régénération de l’enzyme libre
R= Radical
E= Enzyme
Figure 2 : Schéma du processus d'hydrolyse des composés phosphorés organiques par la phosphatase
alcaline (Mc Comb et al., 1979)
3.1 Choix des substrats
Les substrats généralement utilisés pour mesurer les activités de la phosphatase alcaline sont
les suivants (Petterson et Janson, 1978):
1- le méthylumbelliféryl phosphate (MUF-P)
2- le 3.o. méthylfluoresceine phosphate
3- le paranitrophényl phosphate (pNPP)
4- le glycérophosphate
5- le phénol-phtaléine phosphate
Il est admis que les substrats présentant la plus grande sensibilité sont les substrats
fluorescents (substrats n°1 et 2), en particulier le méthylumbelliféryl phosphate (MUF-P). Ce
substrat offre la meilleure sensibilité pour la mesure de l’activité phosphatasique dans les eaux
douces et saumâtres (Petterson et Jansson, 1978 ; Peterson, 1980 ; Hoppe, 1983 ; Chrost et
Overbeck, 1987 ; Carr et Goulder, 1990 ; Olsson, 1990 ; Cotner et Wetzel, 1992), mais
également en milieu marin (Chrost, 1990 ; Martinez et Azam, 1993 ; Christian et Karl, 1995 ;
Koike et Nagata, 1997).
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