La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
2.6 Dosage des différentes fractions du phosphore organique
L’étude des différents réservoirs du phosphore organique et du phosphore inorganique
biodisponible a été entreprise.
Le phosphore inorganique dissous comprend le phosphore réactif au molybdate (SRP) et le
phosphore non réactif (SNRP).
Comme il n’est possible de doser que le SRP, il convient de convertir au préalable les
différentes fractions du phosphore organique en SRP pour pouvoir mesurer leurs
concentrations.
2.7 Dosage des orthophosphates P-PO4 3-
Le phosphore inorganique dissous est surtout présent sous forme d’ion orthophosphate libre
(H2PO4 - et HPO4 2- ), élément clé du fait de sa grande biodisponibilité. Il est en équilibre
dynamique avec l'orthophosphate des composés chimiques solides, cristallins ou amorphes.
De ce fait, la concentration en orthophosphates, à un moment donné, dépend du pH qui agit
sur la solubilité des phosphates, et du potentiel redox qui agit sur la valence ionique de
certains éléments métalliques (fer, manganèse) susceptibles de complexer le phosphore.
La méthode Murphy et Riley (1962) revue par Jean (2002) a été employée pour doser les
SRP. Elle repose sur le principe que les orthophosphates réagissent à pH acide avec le
molybdate d’ammonium et le tartrate double d’antimoine et de potassium pour former un
complexe phosphomolybdique.
Ce complexe, réduit par l’acide ascorbique produit un complexe de molybdène de couleur
bleue. L’absorbance du complexe, mesurée par spectrophotométrie à 885 nm, permet
déterminer la concentration en orthophosphates présents.
Une courbe d’étalonnage avec des étalons compris entre 50 et 500 mM, a été réalisée lors de
chaque dosage.
Ce protocole expérimental permet de détecter des concentrations d’orthophosphates
comprises entre 0,04 et 30 µM (Buscemi, 1999). En utilisant des cuves de 10 cm, les
concentrations minimales décelables atteignent 0,02 µM.
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