La phosphatase alcaline en milieu marin: ses caractéristiques, son ...

tel-00641975, version 1 - 17 Nov 2011
Résultats, Chapitre III : Analyse des activités phosphatasiques de l’eau de
mer au cours d’un cycle annuel
Présentation :
Ce chapitre est consacré à l’étude de l’évolution des activités phosphatasiques de la Petite
Rade et de la Grande Rade au cours du cycle annuel.
L’activité totale sera d’abord présentée. Elle correspond à l’activité de l’eau de mer avant
toute filtration. L’activité dissoute sera ensuite analysée. Elle est mesurée sur de l’eau de mer
après passage sur des filtres de 0,45 µm. La différence entre l’activité totale et l’activité
dissoute permettra d’étudier l’évolution de l’activité particulaire exoenzymatique. L’activité
phosphatasique mesurée sur du matériel particulaire retenu sur des filtres de 0,45 µm, congelé
et broyé, sera enfin décrite. Cette activité correspond à l’ensemble des activités
intracellulaires et exoenzymatiques.
Pour ces expériences, les deux substrats, pNPP et MUF-P, ont été utilisés en parallèle. Dans le
cas du MUF-P, 8 concentrations comprises entre 30 et 0,01 µM ont été employées. Pour le
pNPP seules quatre concentrations ont été préparées : 10, 5, 2,5 et 1,25 mM.
Les résultats ont été ensuite analysés en coordonnées d’Eadie-Hofstee. Cette analyse
permettra de mettre en évidence des activités à forte et à faibles affinités caractérisées
chacune par des Vmax et des Km spécifiques. La somme des Vmax de ces composantes
correspond à la Vmax totale. Elle peut être mesurée directement par l’intersection des courbes
d’Eadie Hofstee avec l’axe des ordonnées. Toutes les Vmax ont été rapportées au volume
d’eau de mer.
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