Diagnostic Biologique de la Fièvre Typhoïde - samu de cote d'ivoire

Diagnostic Biologique
de la Fièvre Fi vre Typhoïde Typho de
Institut Pasteur de Côte d’Ivoire d Ivoire
UFR des Sciences Médicales M dicales Abidjan

Introduction
Salmonelloses = infection due à une bactérie du groupe des
salmonelles
Salmonelloses : Problème d’actualité, répandues dans les
ays en voie de développement
Fièvre typhoide = endémie dans le 1/3 Monde avec incidence
nuelle de 35% et mortalité à Abidjan de 5%
Salmonellose = cause plus fréquente de diarrhée aigue et toxifection
alimentaire

Agents pathogènes
pathog nes
es fièvres fi vres typhoïde typho de et paratyphoïdes
paratypho des
Salmonelloses majeures
quatre sérovars rovars de Salmonella, Salmonella,
strictement
humains, antigéniquement
antig niquement distincts mais de pouvoir
athogène athog ne similaire :
S. typhi, typh
S. paratyphi A,
S. paratyphi B
S. paratyphi C.
= VIH associé associ à salmonelloses dits mineurs (S. ( S.
enteritidis, enteritidis,
S. typhimurium)
typhimurium

Classification des Salmonella
Famille des Enterobacteriaceae
Le genre Salmonella ne comportait qu'une
seule espèce, esp ce, Salmonella enterica. enteric .
Cette espèce esp ce comprend 7 sous-esp sous espèces ces
différenci diff renciées es par leurs biotypes. Les sous-
espèces esp ces sont subdivisées subdivis es en près pr s de 2 000
sérovars rovars sur la base de leurs antigènes antig nes O, H
et de capsule.

PHYSIOPATHOLOGIE
Porte d’entrée: digestive
Intestin:
multiplication
traverse la paroi intestinale
* Ganglions mesentériques (plaques de PEYER): multiplication
Tuphos endotoxine
Voie lymphatique: canal thoracique
Sang Septicémie
Organes:
Rein, Foie, vésicule biliaire
Dose infectante: 10 5 bactéries bact ries
Elimination dans les selles
hémoculture
coproculture

Traitement et Prophylaxie
Traitement curatif: Antibiotiques:
Thiamphénicol
Thiamph nicol, , Chloramphénicol,
Chloramph nicol, Cotrimoxazole,
Cotrimoxazole,
Fluoroquinolones,
Fluoroquinolones,
Prévention
Pr vention
* Mesures d’hygi d hygiène ne +++++
Hygiène Hygi ne collective (alimentaire) et individuelle
* Vaccin
TAB (militaires)
Un vaccin acellulaire spécifique sp cifique de la fièvre fi vre typhoïde typho de (TYPHIM®) (TYPHIM ) est
disponible depuis 1988. (antigène (antig ne capsulaire purifié purifi de S.typhi). S.typh ).

Diagnostic Bactériologique
Bact riologique
direct = certitude
Les hémocultures
mocultures sont l'examen l'examen
capital dans
les fièvres fi vres typhoides, typhoides,
toujours positives au cours
du 1 er septénaire sept naire, , souvent positives au cours du
2ème me septénaire sept naire en absence de traitement
Les coprocultures sont positives dans 20 à
30% des cas, le plus souvent au cours du 2 ème me
septénaire sept naire. . Il faut la répéter r ter en cas de négativit n gativité.

Hémocultur moculture
L'hémoculture
L'h moculture est le moyen essentiel de faire le
diagnostic d'une fièvre fi vre typhoïde. typho de.
Savoir répéter r ter les hémocultures.
h mocultures.
En absence de traitement antibiotique, taux de
positivité positivit
90 % 1 ère re semaine (1 er septénaire)
sept naire)
75 % 2 ème me semaine (2 ème me septénaire)
sept naire)
40 % 3 ème me semaine (3 ème me septénaire)
sept naire)
10 % 4 ème me semaine (4 ème me septénaire).
sept naire).

Coproculture
Coproculture : faible nombre de Salmonella excrétées excr es dans
les selles, cet examen doit être répété : reste souvent
négatif. gatif.
La coproculture n'est donc pas le meilleur moyen de faire le
diagnostic biologique de la fièvre fi vre typhoïde. typho de.
En revanche, en de fin de traitement, traitement,
elle est un bon
moyen de s'assurer que le malade n'est pas devenu porteur
chronique de Salmonella et donc qu'il ne constitue pas une
source de contamination pour son entourage.

Antibiogramme
l’Isolement Isolement du germe doit donner lieu à un
antibiogramme.
Antibiotiques à tester Obligatoirement :
Ampicilline Ampicilline ou Amoxicilline
Chloramph Chloramphénicol nicol
Cotrimoxazole
Cotrimoxazole
Fluoroquinolones
Fluoroquinolones

1 er septénaire
Suspicion clinique de salmonellose
Résultats
et traitement
Hémoculture
+ -
Autres étiologies de
èvre (virale, parasitaire..)
-
Algorithme de diagnostic
2ème septénaire
Coproculture
ou Widal et Félix
+
Résultats
et traitement

But:
Diagnostic indirect:
Sérodiagnostic rodiagnostic de Widal-Félix
Widal lix
Apporter un argument au diagnostic de fièvre fi vre typhoïde typho de (ou
paratyphoïde paratypho de A-B-C) A
isolé. isol
Principe: Principe:
C) au cas où o le germe n'a pu être
Recherche d'anticorps sériques s riques dirigés dirig s contre les antigènes antig nes de
paroi (anticorps anti-O) anti O) et des flagelles (anticorps anti-H) anti H) de
Salmonella typhi (TO-TH), (TO TH), paratyphi A (AO-AH), (AO AH), B (BO-BH) (BO BH) et
C (CO-CH), (CO CH), par une réaction r action d'agglutination
Réalisation alisation pratique :
Prélèvement Pr vement sanguin de 10 ml sur tube sec.

Méthodologie thodologie au laboratoire
Agglutination en Tube (Méthode (M thode de
référence)( rence)(lecture lecture : Turbidimétrie
Turbidim trie)
Longue, fastidieuse, coût co t : consomme des réactifs r actifs
Agglutination en Microplaque
colorimétrique)
colorim trique)
Microplaque (lecture lecture
Rapide, peu coûteuse co teuse ??? Si on ne fait pas de Titrage
TITRAGE TITRAGE EST OBLIGATOIRE
(Mais Mais il n’est n est pas fait par de nombreux laboratoires)

Expression des
résultats sultats
Exprimés Exprim s en terme de dilution maximale du sérum s rum pour
laquelle il y a agglutination
Exemple : typhoïde typho de en période p riode d'état d' tat :
- TO 1/400, 1/400,
TH 1/800 ;
- BO 1/200, (réaction (r action croisée crois e entre TO et BO due à un antigène antig ne
commun).
- AO-, AO , AH- AH BH- BH
Sérodiagnostic rodiagnostic négatif n gatif : pas d'agglutination ou titre < 1/100.
Chez le sujet vacciné vaccin (vaccin TAB), il existe une agglutination
en TH (+) AH (+) BH (+).

Cinétique Cin tique d ’apparition apparition des anticorps
au cours d ’une une fièvre fi vre typhoïde typho de non
Anticorps
agglutinines O
agglutinines H
Apparition
8éme me jour
12éme 12 me jour
traitée: trait :
Taux Maximum
1/400 à 1/800 au 30°j 30
1/1 600
C'est un moyen de diagnostic rétrospectif
Évolution volution
disparition en 2
à 3mois
persistance
pendant de
nombreuses
années ann es

Sérodiagnostic rodiagnostic de Widal–Félix
Widal lix
Faux positifs
Présence Pr sence de Ac TO seul : infection par une Salmonella
ayant un Ag O commun avec S typhi => S. enteritidis
++
Présence Pr sence de Ac BO seul : Infection à S typhimurium
Communautés
Communaut s Ag avec Yersinia pseudotuberculosis
=> Ac BO + ou Ac TO
Faux +: Paludisme, Typhus, Myélomes, My lomes, Collagénoses,
Collag noses,
Infections par les Entérobact Ent robactéries ries

Remarques
Des récidives cidives de fièvre fi vre typhoïde typho de peuvent s'observer
même chez des sujets porteurs de taux élev levés s
d'anticorps anti-O anti O et anti-H anti H (la présence pr sence d'anticorps
n'assure pas toujours l'immunité).
l'immunit ).
La vaccination par le vaccin TAB (antitypho antityphoïde de et
antiparatyphoïde
antiparatypho de A et B) laisse persister des anticorps
anti TH, AH et BH.
Cette signature sérologique s rologique ne doit pas être traitée
trait

Sérodiagnostic rodiagnostic de Widal–Félix
Widal lix
Faux négatifs n gatifs
Négatif gatif pendant le 1er septénaire sept naire
Traitement précoce pr coce par les Antibiotiques
ou les Corticoïdes Cortico des empêche la montée mont e des
Ac
Rares cas de Typhoide sans élévation vation des
Ac

Conclusion (1)
La sensibilité sensibilit du Sérodiagnostic rodiagnostic de Widal
Félix lix est médiocre: m diocre: seulement 10 à 30% des
patients sont positifs et l'antibiothérapie
l'antibioth rapie peut
rendre négative n gative les résultats. r sultats.
La spécificit sp cificité est mauvaise du fait de
l'existence de réactions r actions croisées crois es avec d'autres
infections ou certaines maladies
inflammatoires.
Il n'y a pas de relation entre le titre des
agglutinines et la gravité gravit de la maladie.

Conclusion (2)
Les résultats sultats dissociés dissoci s ou aberrants sont
fréquents. fr quents.
Dans les cas litigieux renouveler les
sérologies, rologies, la cinétique cin tique constatée constat e étant tant alors
d'une aide précieuse pr cieuse
Le sérodiagnostic s rodiagnostic ne trouve son intérêt int rêt que
lorsque l'isolement du germe par
hémoculture moculture ou coproculture n'a pas été
réalis alisé ou qu’il qu il s’est s est révélé r infructueux ,
mais les causes d'erreurs sont nombreuses
et l'interprétation l'interpr tation parfois difficile.

XPÉRIENCES XP RIENCES DE L ’IPCI IPCI DANS
E DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
DE LA FIEVRE TYPHOIDE

Niveau de sensibilité sensibilit des souches
de Salmonella isolées isol es chez
100
80
60
40
20
0
Amox
C1G
C2g
l’adulte(2002)
adulte(2002)
C3G
Genta
Chlor
Sxt
Cipr
Amox
C1G
C2g
C3G
Genta
Chlor
Sxt
Cipr

1- Interêts et limites du sérodiagnostic de
Widal et Félix dans le diagnostic de la
fièvre typhoide (BAKAYOKO S:1999)
Etude transversale
Durée : Avril - Août 1999
Population : 100 patients adressés pour sérodiagnostic
Données collectées : socio-démographiques, cliniques
t biologiques (sérodiagnostic de Widal et Félix -
émoculture - coproculture).

Répartition des hémocultures et
coprocultures selon les résultats
Hémoculture
Coproculture
Positivité Négativité
2
(2%)
- GEP 1(1%)
- Salmonella 1(1%)
-Autres 0
98
(98%)
99 (99%)

Répartition des sérodiagnostics de Widal et
Félix selon les résultats
Résultat
Positivité
Négativité
Effectif (%)
5 (5%)
95 (95%)

2-Evaluation Evaluation des connaissances clinico
biologiques du personnel sur le
sérodiagnostic rodiagnostic de Widal et Félix F lix
(Soumahoro
Soumahoro;2003 ;2003)
Enquête avec interview
Durée: juin –décembre 2003
Population: personnel
* Infirmiers (n=21)
* médecins (n=55)
* personnel de laboratoire (n=11)
Lieux: Abidjan (2CHU, 2HG, 2FSU)

Tableau I: Evaluation de la définition du sérodiagnostic de Widal et Félix
selon le grade du sujet interrogé.
fonction
Médecin Universitaire
n=03
Médecin non Universitaire
n=52
IDE
n=20
Total
réponse exacte
03(100%)
46(85,5%)
04(20%)
53(70,7%)
réponse fausse
0
06(11,5%)
16(80%)
22(29,3%)
80% des infirmier diplômé d’état (IDE) ne savent pas la définition du sérodiagnostic de Widal &
Félix.

Tableau II: Evaluation de la connaissance du seuil de positivité du
sérodiagnostic de Widal et Félix selon le grade.
Fonction
Médecin universitaire
n=03
Médecin non Universitaire
n=52
IDE
n=21
Total
n=76
réponse exacte réponse fausse
01(33,3%)
18(34,6%)
03(14,3%)
22(28,9%)
02(66,7%)
34(65,4%)
18(85,7%)
54(71,1%)

Tableau III : Répartition de la connaissance des examens biologiques autres que le
serodiagnostic de Widal en cas de suspicion de salmonelloses selon le grade
.
Fonction
Médecin Universitaire
n=03
Médecin non
Universitaire
n=35
IDE
n=12
Total
n=50
pas de réponse coproculture hémoculture coproculture
+
hémoculture
0 02(66,7%) 00(00%) 01(33,3%)
0
02(17%)
02
(2 %)
11(31,4%)
06(50%)
19
(38,8 %)
02(5,7%)
03(25 %)
05
(10,2 %)
22(62,9%)
01(08 %)
24
(49 %)

salmonelloses selon la structure.
Structure pas de copro hémo widal copro+
réponse
hemo
CHU
0 02 0 06 0
Treichville
n=08
(25%)
(75%)
CHU
0 09 01 05 0
Yopougon
n=16
(53,6%) (6,3%) (31,3%)
FSU Abobo 0 0 0 05 0
SUD
n=06
(83,3%)
FSU
01 04 0 08 0
Yopougon-
Attié
n=13
(7,7%) (30,8%)
(61,5%)
HG Abobo 0 02 0 02 01
n=07
(28,6%)
(28,6%) (14,3%)
HG Port-bouet
n=05
Total
n=55
0
01
(1,8%)
01
(20 %)
18
(32,7 %)
0
01
(1,8%)
04
(80 %)
30
(54,5%)
0
01
(1,8%)
copro+
widal
0
01
(6,3%)
01
(16,7%)
0
02
(28,6%)
0
04
(7,3%)

Tableau V : Répartition des raisons de la prescription des antibiotiques malgré
la négativité selon la structure.
Structure
CHU Treichville
n=19
CHU Yopougon
n=19
FSU Abobo Sud
n=08
FSU Yopougon-Attié
n=14
HG Abobo
n=09
HG Port-bouet
n=07
Total
n=76
Signes cliniques doute non précis
02(10,5 %)
03(15,8 %)
01(12,5 %)
02(14,3%)
01(11,1 %)
01(14,3 %)
10
(13,3%)
09(47,4 %)
08(42,1 %)
07(36,8 %) 09(47,4 %)
02(25 %)
0
01(11,1%)
02(28,6 %)
21
(28 %)
05(62,5 %)
12(85,7 %)
07(77,8 %)
04(57,1%)
45
(57,3 %)

Tableau VI : Répartition de la méthode technique utilisée au laboratoire pour le
sérodiagnostic de Widal et Félix selon la structure.
Structure
CHU Treichville
CHU Yopougon
FSU Abobo SUD
FSU Yopougon-Attié
Hôpital général Abobo
Hôpital général Port-bouet
Total
agglutination tube agglutination lame
00 02
00 00
00 03
00 02
00 03
00 01
00 11

Tableau VII : Evaluation du type de lecture réalisé au laboratoire selon le grade
du personnel
Grade
Médecin biologiste
n=02
qualitative quantitative
02(100 %) 00(00%)
Technicien supérieur de
laboratoire
n=09
08(88,8 %) 01(11,2 %)
Total 10 01

Au total, le sérodiagnostic
de WIDAL et FELIX
n'est pas le meilleur moyen
.
de faire le diagnostic
biologique de la fièvre typhoïde